細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室如何預(yù)防支原體污染？

在拿到細(xì)胞到開(kāi)始培養(yǎng)的過(guò)程中，預(yù)防支原體污染應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：

1.新購(gòu)產(chǎn)品檢測(cè)

新到的細(xì)胞、培養(yǎng)基、血清都可以做一下簡(jiǎn)單的污染檢測(cè)后再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。另外要注意每次試劑量配制不宜過(guò)多，建議分裝使用，分裝時(shí)用針頭濾器過(guò)濾一次。

2.控制環(huán)境污染

要保證實(shí)驗(yàn)室和培養(yǎng)箱的潔凈，按時(shí)殺菌，可以用酒精擦拭和紫外照射的方法。必要時(shí)可以通臭氧過(guò)夜。

3.嚴(yán)格無(wú)菌操作

進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)一定要按照實(shí)驗(yàn)室的要求，確保無(wú)菌操作。感冒咳嗽時(shí)盡量不要使用細(xì)胞房，如果必須使用，請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)后徹底清潔消毒使用空間。準(zhǔn)備好細(xì)胞房專業(yè)潔凈衣，戴好口罩和手套。

所有進(jìn)超凈臺(tái)的物品**都用酒精擦拭一遍，超凈臺(tái)里面的東西一定要盡量少放，東西太多會(huì)影響超凈臺(tái)內(nèi)空氣流通及空氣除菌細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌;

4.最小化抗生素使用頻率

非珍貴細(xì)胞污染直接丟棄，避免抗生素濫用導(dǎo)致抗藥性產(chǎn)生。

支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。

支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如內(nèi)酰胺類、萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性、常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些氟喹諾酮。

支原體污染在細(xì)胞培養(yǎng)中實(shí)際上是比較常見(jiàn)的, 據(jù)資料, 可達(dá)30%甚至更高。支原體污染時(shí)細(xì)胞表現(xiàn)為長(zhǎng)得不好,也不死亡, 同時(shí), 培養(yǎng)基又是清亮的。時(shí)間長(zhǎng)達(dá)一周也沒(méi)有什么變化。這時(shí)基本上可以判斷出是支原體污染了, 愿意檢測(cè)就檢測(cè)一下，不愿意直接用清除試劑處理。

避免細(xì)胞污染，可以從預(yù)防著手，超凈工作臺(tái)物品放置要合理、進(jìn)入細(xì)胞房要換鞋，穿實(shí)驗(yàn)服，實(shí)驗(yàn)員戴手套后要用酒精消毒、避免細(xì)胞交叉污染等。