細胞支原體污染了怎么辦

細胞支原體污染是一個常見的問題，特別是在細胞培養過程中。支原體污染可能會對細胞的生長、代謝以及實驗結果產生顯著影響。以下是一些處理細胞支原體污染的方法：

一、立即停止使用污染的細胞

一旦確認細胞被支原體污染，應立即停止使用該批次的細胞，并避免其進一步擴散。

二、對污染源進行全面消毒和清潔

對培養環境、試劑和操作過程進行全面消毒和清潔，以消除潛在的污染源。

三、選用適當的處理方法

根據細胞的珍貴程度和實驗需求，可以選擇不同的處理方法：

丟棄污染細胞

對于非重要的細胞，如培養中的細胞、WCB的細胞等，將培養物與用過的培養基滅活后丟棄即可。

使用支原體殺除劑

對于珍貴的、樣品不可再得的細胞，或價格昂貴的種子細胞，可以選用特異性的支原體殺除劑進行清除。例如，使用Mynox?（由Minerva公司生產）等生物制劑，這些試劑可在短時間內（如2-3小時）特異性地殺除支原體，且對細胞無毒性。但需注意，使用這些試劑后可能需要更換新的培養耗材和培養液，并重新培養細胞。

藥物輔助加溫處理

先用藥物處理污染的組織培養物，然后將培養物放在41℃培養18小時，以殺死支原體。但這種方法可能對細胞有不良影響，需要謹慎使用。

使用支原體特異性血清

用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染。特異抗體可抑制支原體生長，經抗血清處理后一段時間（如11天）即可轉為陰性。

巨噬細胞吞噬法

從動物腹腔采取巨噬細胞，純化后加入被支原體污染的細胞培養液中混合培養。巨噬細胞能夠吞噬并清除支原體。

反復離心洗滌

通過細胞營養馴化、優質細胞群的篩選、細胞清洗和反復離心洗滌等方法，利用離心力、細胞、微生物質量和懸液的浮力差達到清除支原體的目的。這種方法可能需要結合敏感抗生素的抑殺作用以提高效果。

更換培養基和耗材

更換新的、經過驗證的無支原體污染的試劑和培養基，并重新開始細胞培養。

四、預防未來污染

在實驗室工作中，應嚴格遵守無菌操作規范，確保實驗環境的清潔和衛生。

定期對實驗設備進行維護和消毒，避免交叉污染。

對于細胞培養等關鍵實驗環節，建議進行定期的質量控制和監測，以確保實驗結果的準確性和可靠性。

五、注意事項

在處理支原體污染時，應仔細閱讀并遵循相關試劑和設備的操作說明。

對于不確定的處理方法，應咨詢實驗室管理人員或相關領域的專家。

支原體污染可能對實驗結果產生顯著影響，因此在實驗前應進行支原體檢測以確認細胞的無污染狀態。