簡單介紹透析胎牛血清應用

透析胎牛血清是牛血清中比較特殊的一種，一些實驗規定必需要用透析胎牛血清培養，那么我們介紹下什么是透析胎牛血清。

透析胎牛血清和胎牛血清的**區別是，前者透析祛除了分子量在1萬以下的小分子，如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素，此外在其他工藝方面沒有任何區別。

透析胎牛血清也是用于細胞培養，但同時，又有自己的一些特殊應用。其用途可歸納如下：

一、摻入研究

例如：有人研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性：即為什么它只感染呼吸道上皮細胞，而不感染其他細胞。

他們將該病毒的F蛋白（融合蛋白）序列克隆入質粒內，并轉染293T細胞。轉染后第20小時，細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養了45分鐘（讓細胞處于饑餓狀態，因培養基中缺少氨基酸），再在同樣上述培養基中培養，但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。

培養4小時后進行分析。即裂解細胞后，用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進行放射自顯影，分析F蛋白的表達情況。發現F蛋白的表達確實增加了，但突變后的F蛋白表達卻無任何變化。結果證實，野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細胞的侵襲。

值得指出的是，用35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸用來標記細胞內的蛋白，結合免疫沉淀用于觀察在某一過程中發生的某一蛋白的變化，從而發現該蛋白所扮演的角色，的確是一個普遍有效的方法（在研究信號分子磷酸化的方面，則需要使用32P標記的磷酸鹽）。

在這其中，透析胎牛血清的使用必不可少，即給細胞創造一個無外源氨基酸干擾的環境。

二、細胞水平的藥物篩選

例如：有人要從化合物庫中篩選S1P4受體的拮抗劑，以抑制流感病毒帶來的免疫激活導致的肺損傷。他采用報告基因進行監測。為了避免細胞培養環境中存在的小分子的干擾，他也需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養基來培養細胞。

類似在藥物研發過程中，采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因，基于細胞平臺的高通量藥物篩選，也都需要無外源小分子的培養體系，因而也要用透析胎牛血清。

三、細胞克隆的篩選

包括雜交瘤細胞和CHO細胞等，由于在進行細胞篩選時，需要無外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾，因此也需要用到透析胎牛血清。