奶與奶制品中嗜冷假單胞菌的計數

2009年，ISO發布了ISO/TS 11059:2009，對奶與奶制品中嗜冷假單胞菌的計數方法進行了描述，通過該方法，能夠對產色素和不產色素的嗜冷假單胞菌進行分離。該標準也適合乳業的環境樣本。

乳業在我國發展迅速，而且品種豐富，包括液體奶（包括巴氏殺菌奶，超高溫奶）、酸乳、冰淇淋、果汁果味乳、雪糕、酸乳飲料、麥乳精等。其中液體奶占主要部分，巴氏殺菌奶又占液體奶的主要部分。在巴氏殺菌奶中，常常有低溫菌的存在。低溫菌即嗜冷菌，能在7℃以下繁殖。當冰箱中貯存的奶超過保存期，就會造成低溫菌的大量繁殖，引起產品變質。乳被低溫菌污染被認為是影響奶保質期的最為關鍵的因素。也就是說，耐冷假單胞菌被認為是巴氏殺菌奶最為重要的腐敗菌。

ISO/TS 11059:2009即是對耐冷假單胞菌的檢測和計數。其中分離假單胞菌的培養基推薦的是PPA平板，在25℃孵育48h，然后計數。保留菌落總數在150以下的平板，挑取5個菌落進行純培養和驗證試驗。

驗證試驗包括氧化酶試驗和葡萄糖發酵試驗。氧化酶試驗可使用氧化酶反應試紙，加樣后如為陽性，則在5秒至30秒內試紙變為紫紅色。葡萄糖發酵試驗可使用葡萄糖瓊脂，HiMedia貨號是M1589，配方和ISO完全一致。假單胞菌為氧化酶試驗陽性，葡萄糖發酵陰性。不過ISO也指出，某些假單胞菌菌株也可能在瓊脂表面產生黃色。

PPA培養基也可從HiMedia購買，貨號為M1788，品名為Penicillin and Pimaricin Pseudomonas Agar Base，配合兩個添加劑(貨號FD 264和FD 265) 一起使用。假單胞菌如需進一步鑒定到種，可使用非發酵菌生化鑒定試劑盒（HiMedia貨號KB019），該試劑盒包含24種生化反應，可鑒定的假單胞菌有19種。

HiMedia的假單胞菌顯色培養基和假單胞菌分離瓊脂同樣值得注意。前者品名為HiFluoro Pseudomonas HiVeg Agar Base，貨號是MV1469。該培養基含有特異性熒光劑，銅綠假單胞菌裂解熒光劑，從而紫外燈下發出熒光（下圖左面）。后者（貨號為M406）含有三氯生，一種廣譜抗菌劑，但假單胞菌對其耐受，可以生長。

HiMedia公司是國際知名微生物產品生產商，一直致力于微生物培養基和細胞培養基的研發和生產，具有WHO GMP認證、ISO9001：2008，ISO13485：2003認證，CE認證和FDA注冊登記。其產品行銷全球140多個國家。

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