預(yù)防和清除支原體污染的細胞培養(yǎng)方法

3.對抗生素部分耐藥。

4.只有支原體對抗生素耐藥。

最后一種情況是最差的，因為支原體可以通過氣溶膠傳播。在抗生素敏感的情況下，抗生素能防止細菌和真菌繁殖，但從一開始就沒有能力預(yù)防支原體。因此，在細胞培養(yǎng)中長時間連續(xù)使用抗生素，不僅是沒有幫助的，而且也會引起很多的問題。然而，在原代培養(yǎng)中，短期（前兩周）使用抗生素（青霉素/鏈霉素），是至關(guān)重要的。因為抗生素在培養(yǎng)基中不穩(wěn)定，強烈建議每隔兩三天進行一次換液。

丟棄或治療支原體污染的細胞

如果被支原體污染的細胞較為珍貴或稀少，建議進行清除支原體的治療。否則，建議丟棄支原體污染的細胞，因為它們被認為是實驗室污染的來源。

被污染的細胞應(yīng)該丟棄，以避免成為污染源。但對于珍貴的細胞，可使用Minerva Biolabs公司的Mynox Gold?支原體清除劑。Mynox Gold?支原體清除劑是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌，可與支原體膜特異性結(jié)合，破壞膜通透性，導(dǎo)致支原體膨脹破裂而死。使用Mynox?一般在2-3個小時即可完成清除任務(wù)。

隔離任何來源的新細胞

正如前面章節(jié)中描述，從其他實驗室?guī)淼男录毎俏廴镜闹饕獊碓础Ｒ虼耍谛录毎魅魏斡猛局埃斜匾綦x細胞，并檢查是否有支原體污染。

減少氣溶膠的產(chǎn)生

在生物安全柜或細胞培養(yǎng)箱中細胞操作產(chǎn)生的氣溶膠，以及人員自身產(chǎn)生的氣溶膠，在實驗室中都會傳播支原體污染。因此，避免產(chǎn)生氣溶膠的活動有助于預(yù)防細胞培養(yǎng)中的支原體污染。

支原體檢查的重要性

根據(jù)一些報告，在美國和歐洲，正在培養(yǎng)的細胞或細胞庫凍存的細胞中，支原體污染的幾率大約是15%至35%。因此，經(jīng)常進行支原體檢查是非常必要的。

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英文原文：

Methods for prevention of mycoplasma contamination in cell culture

Improve aseptic techniques and practices

A precise supervision of new workers in the lab by a skilled operator to follow good aseptic techniques can help to reduce the risk of mycoplasma contamination. It is highly recommended to prepare the reports of all cell contamination incidents to solve the problem of contamination .

Test cultures for contamination