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誰動了你的細胞——趕走支原體

2017-12-07 11:07來源:威正翔禹生物


為什么有些細胞實驗無法重復?

為什么有的細胞在相當長的時間里,都養不到**狀態?

為什么實驗室中,超過一株以上的細胞都時好時壞?

細胞生長緩慢、細胞變形、碎片增加、懸浮細胞容易成團培養基提前變色、鏡下發現有小黑點……

如果排除了其他試劑選擇不當、細胞株老化、細菌污染等原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示——你的細胞可能被支原體污染了!

. 電鏡下的支原體

支原體污染普遍存在

據美國數據統計,細胞發生支原體污染的幾率在70%以上。同時,由于支原體直徑很小,僅在180nm~350nm之間,只有通過電鏡才能看到,不易被實驗者肉眼發覺,支原體污染逐漸成為一個普遍存在的問題。

支原體污染的危害

支原體污染是個循序的過程,普通抗生素對其無效。因此,支原體污染有多煩人,相信實驗人都領教過了。

1、細胞狀態不佳,生長速度慢,實驗無法推進。

2、細胞內DNA、RNA及蛋白表達發生改變,影響實驗結果,導致實驗數據不準確,時間、經費的浪費。

3、一株污染的細胞成為實驗室的污染源,對工作區域以及培養箱和液氮罐造成污染,進而污染其他細胞,導致其他細胞繼發性污染,實驗受影響,數據無法重復,預期結果出不來。

如何有效把支原體趕出細胞?

對于已耗費很多時間大量擴增起來的細胞,或經過基因轉染、體外刺激等大量工作處理過的細胞,如果發現細胞被支原體污染了,怎么辦?由于前期工作量巨大,我們無法丟棄已有細胞。但由于價格原因,又無法使用那些昂貴試劑殺除細胞上的支原體,同時,實驗人員還需要清除細胞上的支原體污染,讓實驗得以往下推進,以最終獲得準確的實驗數據。

實驗者可選用對支原體特效的抑制劑,通過對細胞的前期處理,中期加藥,逐步通過4代左右的培養,從而將支原體污染徹底清除,確保試驗順利推進,結果準確。全世界此類試劑眾多,威正翔禹生物周圍的實驗人做過很多嘗試,其中效果最確切且性價比很高的當屬德國Minerva公司的ZellShield?祛除劑。

Zell Shield?是一種即用型新型復合抗生素,副作用極低,能有效地祛除細胞培養支原體、細菌、真菌污染。Zell Shield?使用方法簡單,直接加入培養基中保護細胞。

它的原理:通過抑制支原體增殖中某種蛋白的合成,達到抑制新的支原體增殖的目的。屬復合型的新型抗生素。它廣泛適用于細胞培養相關的科研和工業領域。

特點

1、適用范圍廣

普通細胞培養和原代細胞培養

2、無細胞毒性

目前,Zell Shield?對多種細胞系都無細胞毒性。

3、高效廣譜

祛除支原體效果明顯,同時對細胞內和細胞外的革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、病原蟲、真菌等污染亦可有效預防。

4、操作簡便

可直接加入到預處理的培養基或細胞中進行消毒。

5、穩定性高

在細胞孵育期內,Zell Shield?始終保持穩定的活性。

6、低耐藥風險

精心挑選的新型復合抗生素只有極低的耐藥風險,多種抗生素聯合使用幾乎不會產生耐藥突變株。

操作步驟:

**步:研究發現,98%的支原體污染發生在細胞間隙。因此,首先要把細胞消化下來,放入離心管,懸浮沖洗,離心,棄上清,反復三次。此時可將細胞上大部分的支原體去除,為進一步加藥抑制做好準備。

第二步:培養液中加入1%的ZellShield?,細胞進行正常培養。新的支原體增殖受到抑制,舊的支原體隨著細胞的換液逐步減少,通過4代左右的培養,細胞中的支原體基本可被徹底清除。

注:使用ZellShield?時,不需使用鏈青霉素。

此試劑價格約2200元/50ml,可保證大量細胞的實驗得以順利推進。

總之,細胞培養中,支原體污染發生頻繁。有時帶來的危害會造成實驗的巨大損失。應經常檢測和及時排除支原體污染,讓細胞在健康安全的環境下生長,為獲得準確的實驗結果,打下良好的基礎。

附:關于德國Minerva公司

Minerva Biolabs GmbH 公司是世界**的微生物污染控制公司,特別是支原體和軍團菌的技術和產品,在世界上遙遙領先。公司總部設立于德國柏林,專注微生物污染檢測與清除產品的研發和銷售。

威正翔禹生物(Vian-saga),是德國Minerva公司十年來在中國的**合作伙伴,一直被國內生物界譽為“值得持續信賴的優秀供貨商”。為國內眾多科研機構、生物藥廠提供高效的支原體污染祛除保障,同時,更以優質、可靠的原裝進口血清,為國內細胞培養實驗室提供堅實有力的試劑支持。