細胞培養新手必讀！

　　在進行科學研究時，細胞培養作為一項基本的研究方法，經常會被用到。可細胞培養到底是什么樣的過程呢？下面是我們的實驗員培養細胞的心得體會：一養細胞深似海，從此自由是路人。開始養細胞之前就要做好隨時照顧它的心理準備，三天打魚兩天曬網不僅無法養出狀態絕佳的細胞，還有可能讓嬌貴的細胞寶寶全軍覆沒，那么，怎么才能培養出符合條件的細胞呢？

　　1、選擇正確的培養基

　　在養細胞之前，就要了解，你所養細胞的來源以及種類和名稱，查閱一定量的文獻，確定所需培養液種類以及是否需要添加特殊成分，常用的細胞培養液有DMEM、RPMI1640、F12等等，一些常見的細胞基本可以使用這幾種培養基中的一種來培養，有的需要加入一定其他成分，這需要根據不同的細胞類型，查ATCC細胞庫或者查文獻，才能找到所需**培養液。選擇正確的培養液是養好細胞的**步。

　　2、了解細胞的生長習性

　　不同的細胞生長習性不同。如成纖維細胞是貼壁生長，有一定的密度依賴性，密度小可能會出現不增殖，狀態差的情況，接種密度大時則需要隔天傳代，頻繁傳代則影響細胞狀態；再如RPMI-8226人多發性骨髓瘤細胞，是懸浮生長的，傳代需離心棄去上清即可。總之，了解細胞生長習性，再加上正確的計數，才能掌握好傳代的密度。

　　3、選擇優質的血清

　　血清中含有細胞生長所必須的生長因子，作為哺乳動物細胞培養的附加物，血清的添加是十分重要的，因此，選擇優質的血清，是細胞養殖成功與否的關鍵！

　　4、及時傳代和更換培養液

　　在細胞增殖到一定的密度后，要及時傳代，根據細胞的生長速度和密度，及時更換培養液。更換過勤，浪費培養液，更換不夠及時，則細胞狀態轉差，一般需隔天更換培養液，具體可根據所養細胞種類予以調整。

　　5、絕對的無菌意識

　　前面林林總總全部都注意好了，如果無菌意識差，細胞中混入了微生物，則千里之堤潰于蟻穴，細菌的生長速度和破壞力，將迅速占領培養皿，破壞細胞結構，有些初學者會在培養液中加入1%的雙抗，但是，無菌意識不強，雙抗亦無法拯救你的細胞！

　　6、傾心的呵護，頻繁的觀察

　　做到以上幾點，就可以開始養你的細胞了，但是再次重申細胞嬌弱，在養細胞的過程中，難免會出現一些意想不到的問題，要想成功養好細胞，時時惦記它 ，頻繁地觀察，初期一天觀察2次都不足為過，出現任何預料外的情況，及時處理，才能保障收獲一盤“漂亮”的細胞。

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