祛除實驗室中恒溫水環境中的支原體污染，提高實驗結果穩定性

在細胞實驗過程中，需要用到裝有恒溫水的儀器，對樣品進行處理或給細胞培養提供支持，例如水浴鍋、培養箱水槽等設備。作為維持細胞生長與實驗條件穩定的關鍵設施，其清潔與無菌狀態直接關系到實驗結果的準確性和可靠性。

實驗室中常見的恒溫水浴環境有哪些？

細胞實驗室中的恒溫水浴環境主要包括水浴鍋、培養箱中水槽以及用于某些實驗步驟的恒溫平臺等。這些設備通過精確控制溫度，為細胞培養、等提供了穩定的實驗條件。然而，這些穩定的環境也為微生物的生長提供了便利條件。

為什么恒溫水浴環境容易發生支原體污染？

溫度適宜：支原體是一類對溫度敏感的微生物，恒溫水浴提供的穩定溫度恰好符合其生長需求，使得支原體得以迅速增殖。

濕度較高：恒溫水浴環境通常保持一定的濕度，有利于微生物的生存和繁殖。

營養源豐富：一旦細胞實驗室中清潔工作稍有松懈，細胞培養過程中使用的培養基、血清等富含營養物質的試劑，混入到恒溫水浴環境中，很容易成為支原體的食物來源。

操作頻繁：實驗人員頻繁地打開和關閉水浴箱蓋，以及使用未徹底消毒的器材，都會增加支原體污染的風險。

為什么要預防支原體污染？

細胞形態改變：支原體感染會導致細胞形態發生不規則變化，如細胞大小改變、細胞膜破壞等，影響細胞的正常生理功能。

生長受抑制：支原體污染會干擾細胞的正常生長和增殖過程，導致細胞數量減少或生長速率減緩。

基因表達和蛋白質合成異常：支原體感染可能引起細胞內基因表達的異常，影響蛋白質合成和細胞信號傳導途徑，進而影響細胞的生物學功能。

細胞凋亡增加：部分支原體感染會誘導細胞凋亡（程序性細胞死亡），導致細胞數量減少和形態學變化。

影響實驗結果： 由于支原體感染引起的細胞變化，實驗結果可能會受到嚴重干擾，導致數據不準確、可重復性差。這對于依賴細胞生物學特性、信號傳導途徑或藥物反應等研究的實驗結果尤為重要。錯誤的實驗結果不僅會影響科學研究的進展，還可能誤導臨床應用和藥物開發。

如何預防恒溫水浴環境發生支原體污染？

一、加強實驗室環境管理

保持實驗室的清潔度和無菌狀態，定期清潔和消毒恒溫水浴設備及其周圍環境。每天為水浴鍋、培養箱水槽更換無菌水，能減少一部分污染的發生，但在實際操作過程中這樣的處理無疑是耗時又耗力的，為了解決這一問題，往往需要在細胞培養相關的恒溫水中加入抑菌試劑。這類試劑的選擇也十分有講究。我們日常生活中的常見的抑菌溶液有這幾種：次氯酸、硫酸銅、新潔爾滅、次氯酸鈉，但以上幾種溶液都有難以規避的缺點。次氯酸容易分解，與病菌作用后就會降解，無法持續作用，且無法對失效的消毒液做出指示；硫酸銅和新潔爾滅容易腐蝕水盤；次氯酸鈉溶液易揮發出次氯酸，對細胞造成傷害。我們選擇消毒液的關鍵點，就是成分安全穩定、不會損害儀器、不易揮發影響細胞。市場上主流的水環境支原體預防試劑——德國MB公司生產的Water Shield，可以很好地解決以上問題。

該試劑含有表面活性劑和季銨化合物，并且配合絡合劑成分，有效抑制微生物生長的同時，還能保持水分。另外，水槽支原體預防試劑Water Shield本身不會導致水垢產生，兼容玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、鋼、貴金屬和其他金屬，不會腐蝕儀器。

不僅如此，水槽支原體預防試劑Water Shield本身也是一個“指示器”，在微生物嚴重污染、需要更換水的情況下溶液會從淺藍色變為無色，保證消毒溶液的有效性。

產品成分不含醛或疊氮化物，不會揮發。因此，水槽支原體預防試劑Water Shield對于CO2培養箱中的細胞是安全的。

按照正確的使用說明操作處理后的液體，在長達4周內，不會受到細菌、真菌和支原體的污染。

使用起來也很方便快捷。水槽支原體預防試劑Water Shield是200倍濃縮液。CO2培養箱水槽大概是一般為1-2L水只需添加一瓶10ml即可。而且該試劑僅需室溫儲存，降低了對儲存設備的要求。

二、嚴格把控試劑和培養基質量：除了做好實驗室的清潔工作，選擇高品質的實驗試劑，也是實驗成功對的重要保障。以細胞實驗中常見的胎牛血清為例。

三、規范細胞培養操作：遵守無菌操作規范，使用一次性或經過嚴格消毒的器材進行細胞培養。減少在恒溫水浴環境中的停留時間，避免交叉污染。

四、定期檢測微生物污染風險：定期對實驗室環境和恒溫水浴系統進行微生物污染檢測，包括支原體污染的檢測。一旦發現污染問題，立即采取措施進行處理。

祛除細胞實驗室中恒溫水浴環境中的支原體污染是保障實驗結果穩定性的重要環節。通過加強實驗室環境管理、嚴格把控試劑和培養基質量、規范細胞培養操作以及定期檢測微生物污染風險等措施，我們可以有效降低支原體污染的風險，為細胞培養和科學研究提供安全、可靠的環境保障。