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實驗室細胞培養支原體污染怎么辦?

2024-07-19 15:15

支原體污染是實驗室細胞培養中常見的問題,它能引起細胞生理和代謝變化,影響實驗結果的準確性和重復性。因此,及時識別和處理支原體污染至關重要。

判斷標準

1.pH值變化:支原體污染可能會導致培養基pH值異常。

2.細胞形態變化:污染后的細胞可能形態異常,生長速度減慢。

3.細胞黏附性變化:某些類型的細胞可能會失去黏附性。

4.細胞死亡率增加:細胞的存活率下降,死亡率提高。

檢測方法

1.直接培養:將樣本接種到支原體專用培養基中,觀察是否有生長。

2.熒光染色:使用熒光標記的DNA探針特異性結合支原體的DNARNA,通過熒光顯微鏡檢查。

3.PCR檢測使用特異性引物檢測支原體的DNA,這是一種快速、敏感的檢測方法。

4.ELISA檢測:通過檢測細胞培養上清液中支原體特異性抗原來識別污染。

處理方法

1.廢棄嚴重污染的細胞:如果細胞嚴重污染,最安全的方法是廢棄這些細胞,徹底清洗并消毒使用過的器皿和設備。

2.使用抗生素或者專業的細胞支原體祛除試劑治療:

推薦使用MB公司生產的復合抗生素Zell Shield?。Zell Shield?通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。   
3.徹底清潔和消毒:對實驗室表面、設備以及操作環境進行徹底的清潔和消毒。

4.防止交叉污染:確保使用無菌操作技術,包括使用無菌工具和消毒設備,以防止污染擴散。

5.定期檢測:即使沒有明顯的污染跡象,也應定期對細胞培養進行支原體檢測,以確保培養環境的清潔。