實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)支原體污染怎么辦？

支原體污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的問(wèn)題，它能引起細(xì)胞生理和代謝變化，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。因此，及時(shí)識(shí)別和處理支原體污染至關(guān)重要。

判斷標(biāo)準(zhǔn)

1.pH值變化：支原體污染可能會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH值異常。

2.細(xì)胞形態(tài)變化：污染后的細(xì)胞可能形態(tài)異常，生長(zhǎng)速度減慢。

3.細(xì)胞黏附性變化：某些類型的細(xì)胞可能會(huì)失去黏附性。

4.細(xì)胞死亡率增加：細(xì)胞的存活率下降，死亡率提高。

檢測(cè)方法

1.直接培養(yǎng)：將樣本接種到支原體專用培養(yǎng)基中，觀察是否有生長(zhǎng)。

2.熒光染色：使用熒光標(biāo)記的DNA探針特異性結(jié)合支原體的DNA或RNA，通過(guò)熒光顯微鏡檢查。

3.PCR檢測(cè)：使用特異性引物檢測(cè)支原體的DNA，這是一種快速、敏感的檢測(cè)方法。

4.ELISA檢測(cè)：通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中支原體特異性抗原來(lái)識(shí)別污染。

處理方法

1.廢棄嚴(yán)重污染的細(xì)胞：如果細(xì)胞嚴(yán)重污染，最安全的方法是廢棄這些細(xì)胞，徹底清洗并消毒使用過(guò)的器皿和設(shè)備。

2.使用抗生素或者專業(yè)的細(xì)胞支原體祛除試劑治療：

推薦使用MB公司生產(chǎn)的復(fù)合抗生素Zell Shield?。Zell Shield^?通過(guò)阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。   
3.徹底清潔和消毒：對(duì)實(shí)驗(yàn)室表面、設(shè)備以及操作環(huán)境進(jìn)行徹底的清潔和消毒。

4.防止交叉污染：確保使用無(wú)菌操作技術(shù)，包括使用無(wú)菌工具和消毒設(shè)備，以防止污染擴(kuò)散。

5.定期檢測(cè)：即使沒(méi)有明顯的污染跡象，也應(yīng)定期對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行支原體檢測(cè)，以確保培養(yǎng)環(huán)境的清潔。