細胞支原體污染了怎么辦

細胞支原體污染是一個常見的問題，特別是在細胞培養(yǎng)過程中。支原體污染可能會對細胞的生長、代謝以及實驗結(jié)果產(chǎn)生顯著影響。以下是一些處理細胞支原體污染的方法：

一、立即停止使用污染的細胞

一旦確認細胞被支原體污染，應(yīng)立即停止使用該批次的細胞，并避免其進一步擴散。

二、對污染源進行全面消毒和清潔

對培養(yǎng)環(huán)境、試劑和操作過程進行全面消毒和清潔，以消除潛在的污染源。

三、選用適當?shù)奶幚矸椒?/span>

根據(jù)細胞的珍貴程度和實驗需求，可以選擇不同的處理方法：

丟棄污染細胞

對于非重要的細胞，如培養(yǎng)中的細胞、WCB的細胞等，將培養(yǎng)物與用過的培養(yǎng)基滅活后丟棄即可。

使用支原體殺除劑

對于珍貴的、樣品不可再得的細胞，或價格昂貴的種子細胞，可以選用特異性的支原體殺除劑進行清除。例如，使用Mynox?（由Minerva公司生產(chǎn)）等生物制劑，這些試劑可在短時間內(nèi)（如2-3小時）特異性地殺除支原體，且對細胞無毒性。但需注意，使用這些試劑后可能需要更換新的培養(yǎng)耗材和培養(yǎng)液，并重新培養(yǎng)細胞。

藥物輔助加溫處理

先用藥物處理污染的組織培養(yǎng)物，然后將培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時，以殺死支原體。但這種方法可能對細胞有不良影響，需要謹慎使用。

使用支原體特異性血清

用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染。特異抗體可抑制支原體生長，經(jīng)抗血清處理后一段時間（如11天）即可轉(zhuǎn)為陰性。

巨噬細胞吞噬法

從動物腹腔采取巨噬細胞，純化后加入被支原體污染的細胞培養(yǎng)液中混合培養(yǎng)。巨噬細胞能夠吞噬并清除支原體。

反復(fù)離心洗滌

通過細胞營養(yǎng)馴化、優(yōu)質(zhì)細胞群的篩選、細胞清洗和反復(fù)離心洗滌等方法，利用離心力、細胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達到清除支原體的目的。這種方法可能需要結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用以提高效果。

更換培養(yǎng)基和耗材

更換新的、經(jīng)過驗證的無支原體污染的試劑和培養(yǎng)基，并重新開始細胞培養(yǎng)。

四、預(yù)防未來污染

在實驗室工作中，應(yīng)嚴格遵守無菌操作規(guī)范，確保實驗環(huán)境的清潔和衛(wèi)生。

定期對實驗設(shè)備進行維護和消毒，避免交叉污染。

對于細胞培養(yǎng)等關(guān)鍵實驗環(huán)節(jié)，建議進行定期的質(zhì)量控制和監(jiān)測，以確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。

五、注意事項

在處理支原體污染時，應(yīng)仔細閱讀并遵循相關(guān)試劑和設(shè)備的操作說明。

對于不確定的處理方法，應(yīng)咨詢實驗室管理人員或相關(guān)領(lǐng)域的專家。

支原體污染可能對實驗結(jié)果產(chǎn)生顯著影響，因此在實驗前應(yīng)進行支原體檢測以確認細胞的無污染狀態(tài)。