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PCR實(shí)驗(yàn)室中的氣溶膠污染從何而來？

2024-06-18 17:01

PCR實(shí)驗(yàn)室中的氣溶膠污染主要來源于兩個(gè)過程：樣本制備過程和PCR擴(kuò)增過程。

樣本制備過程：

樣本液體面與空氣摩擦?xí)r可形成氣溶膠。在樣本制備過程中，較劇烈地?fù)u動(dòng)反應(yīng)管、開蓋時(shí)、吸樣時(shí)及加樣器的反復(fù)吸樣都可能形成氣溶膠，從而引發(fā)污染。

待測(cè)強(qiáng)陽(yáng)性樣品，尤其是放置樣品的容器被污染或容器密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染，以及待提取樣本中含有高濃度的陽(yáng)性核酸，也容易形成氣溶膠造成污染。

PCR擴(kuò)增過程：

PCR擴(kuò)增可以引起實(shí)驗(yàn)室中擴(kuò)增產(chǎn)物的累積。通常一次典型的PCR擴(kuò)增可以產(chǎn)生高達(dá)109拷貝的靶序列，如果氣溶膠化，甚至最小的氣溶膠都會(huì)含有106拷貝的擴(kuò)增產(chǎn)物。

如果不加以控制，在短期內(nèi)累積的氣溶膠化擴(kuò)增產(chǎn)物就會(huì)污染實(shí)驗(yàn)室中的試劑、儀器設(shè)備和通風(fēng)系統(tǒng)。

氣溶膠污染在PCR實(shí)驗(yàn)室中是一個(gè)嚴(yán)重的問題，因?yàn)榧词故菢O微量的污染也足以造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽(yáng)性，進(jìn)而可能導(dǎo)致臨床做出錯(cuò)誤的判斷和決策，并可能引發(fā)后續(xù)的醫(yī)療事故和恐慌。

為了避免PCR實(shí)驗(yàn)室中的氣溶膠污染，需要采取一系列嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理措施，如建立標(biāo)準(zhǔn)的正負(fù)壓系統(tǒng)及四分區(qū)（或三分區(qū)）的PCR實(shí)驗(yàn)室，確保在無菌無塵環(huán)境下進(jìn)行操作，以及加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室人員的培訓(xùn)和監(jiān)管等。