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如何快速鑒別細胞污染類型

2024-05-21 15:39

細胞污染通常指的是細胞培養中的生物污染,主要類型包括細菌污染、真菌污染、支原體污染、黑膠蟲污染和病毒污染等。以下是一些快速鑒別細胞污染類型的方法:

觀察培養液的變化:

細菌污染:培養液一般會渾濁變黃,稍微振蕩后可見培養基表面有漂浮物。

真菌污染:培養液通常保持清亮,不變色,但可見淡黃色或白色漂浮在培養基表面的點狀菌落。

支原體污染:培養液一般會渾濁,但細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。

黑膠蟲污染:在低倍鏡下觀察時可見黑色小點,高倍鏡下可看見黑色的小蟲游來游去。

顯微鏡觀察:

細菌污染:在高倍鏡下可見桿狀或球狀的細菌在培養基中游動。

真菌污染:鏡下可見絲狀物,有些像珊瑚狀,慢慢會長出很細的黑色絲狀物。

支原體污染:在鏡下呈黑色微小顆粒,多位于細胞與細胞之間。

熒光染色法觀察:

支原體污染:用熒光染料與DNA特異地結合,可使支原體內的DNA著色,熒光顯微鏡下支原體成綠色小點,散于細胞周圍或附于細胞表面。

其他檢測方法:

電鏡檢測:條件許可時,可用掃描電鏡或投射電鏡觀察支原體污染。

培養檢測:對于支原體污染,可以將細胞懸液加入支原體肉湯培養基,觀察肉湯培養基有無霧狀沉淀,然后進行分離培養觀察有無特定菌落出現。

PCRELISA等分子生物學方法:可以檢測病毒、細菌和真菌等微生物的核酸和蛋白質等分子特征,從而可以快速準確地檢測到污染物。

細胞生長和形態觀察:

注意觀察細胞生長狀態和形態的變化,如生長緩慢、細胞變圓脫落等,可能是污染的表現。