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什么是Taq酶切割探針

2024-05-06 16:25

Taq酶切割探針是指在PCR擴增過程中,Taq聚合酶(也稱為Taq酶)在鏈延伸時遇到與模板結合的TaqMan探針時,利用其5'→3'外切核酸酶活性將探針切斷的過程

TaqMan探針是一種雙標記的寡核苷酸探針,包括一個熒光素和一個熒光淬滅素。在探針完整時,熒光素和熒光淬滅素被緊密連接,導致熒光素所發出的熒光能量被淬滅素吸收,儀器檢測不到熒光信號。然而,當Taq酶在鏈延伸過程中遇到與模板結合的探針時,其5'→3'外切核酸酶活性會將探針切斷,使熒光素和熒光淬滅素分離,從而釋放出熒光信號。

通過實時監測這些熒光信號的累積,可以準確地確定靶標DNA序列的存在與數量。這種技術具有高特異性和靈敏度,在基因診斷和個體化用藥分析等領域具有廣泛的應用。