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支原體標準品靈敏度跟儲存有關嗎?

2024-04-28 16:24
文章附圖

在支原體標準品的處理和保存過程中,凍干粉是一種新型的形式。通過凍干技術將溶液中的水分去除,以實現標準品長期儲存的穩定性、運輸的便利性等。

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然而,有不少實驗人員,經常會隨手將試劑丟盡-20℃冰箱中,認為這樣可以更好地保存試劑。事實上,對于凍干粉而言,2-8℃已經是非常適合凍干粉儲存的溫度了,在該溫度下,凍干粉試劑可以穩定地長期儲存(以德國MB公司的支原體檢測標準品系列為例)。那么,為什么我們習慣性認為的冷凍低溫保存,遇到凍干粉就不靈了呢,甚至適得其反?本期內容為各位答疑解惑。


水分重新進入凍干粉的問題主要涉及到物質的熱力學性質和環境條件的變化。

凍干粉是通過凍干技術將溶液中的水分去除得到的干燥粉末,這有助于保持支原體標準品的穩定性和長期保存性。但由于凍干粉本身并非一點水分都沒有,而是含有十分微量的殘留水分。如果將凍干粉再次暴露于冷凍溫度,環境中的水蒸氣會以氣態形式存在,吸附在粉末之間,導致凍干粉的含水量增加,使得后續配制溶液所得到的濃度出現偏差,從而影響實驗結果。


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另外,隨著環境條件的變化,比如溫度的升高或相對濕度的增加,環境中的水蒸氣會向粉末中迅速擴散,并重新溶解到粉末內部。這個過程導致凍干粉迅速吸濕,使得原本干燥的粉末逐漸變軟,并最終重新溶解成液體。水分的重新溶解可能會導致支原體標準品的水分含量、結構變化或損壞,從而影響其活性和可靠性。

因此,為了確保支原體標準品的質量和穩定性,建議按照說明進行儲存,這樣可以有效地防止水分重新進入粉末中,保持支原體標準品的長期穩定性和可靠性。


10 CFU? 支原體檢測限標準品

10 CFU? Mycoplasma Sensitivity Standards

歐洲藥典和日本藥典要求,如果用NAT法(核酸擴增檢測的英文簡稱,包括PCR/qPCR)替代培養法檢測支原體時,NAT法檢測的靈敏度需達到10CFU/ml。

德國MB公司提供系列的支原體靈敏度標準品(滅活支原體),涵蓋了歐洲藥典和日本藥典規定的所有支原體物種(見下表),用于支原體核酸擴增法(PCR/qPCR)的方法學驗證(檢測限和耐用性驗證)。


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注意:10CFU?支原體標準品使用前在2-8℃保存,性能穩定。支原體復溶后要立即進行DNA抽提,不要再保存,因為擔心可能降解。

(2)產品特點

(1)來自英國菌種保藏中心NCTC,是滅活支原體

(2)傳代次數少,支原體無變異

(3)產品為凍干粉,保證其穩定性

(4)分析證書(COA)提供該批次GU:CFU比值(基因組單位/菌落形成單位比值)

(5)支原體已滅活,保障細胞實驗室安全

(3)操作說明

標準品在復溶前,在室溫放置平衡。

(1)標準品短時離心,以收集凍干粉至管底。

(2)每管中加入1ml樣品基質液(需保證無支原體污染)。

(3)室溫靜置5分鐘。

(4)渦旋混合10秒鐘,再離心10秒鐘。

(5)復溶后的標準品即可用于DNA抽提。推薦使用MB的支原體DNA提取試劑盒 (英文名:Venor?GeM Sample Preparation Kit)(每管核酸純化柱加200μl復溶標準品)。