支原體檢測之符合藥典方法驗證

支原體檢測的藥典方法主要包括兩種：分離培養法和指示細胞法。

分離培養法是檢測支原體的金標準方法，其原理是從樣品細胞培養體系中取樣，接種到適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會在這種瓊脂平板上瘋狂生長，最終形成明顯可見的特征性菌落。這種方法很少會出現假陰性結果，檢測精確度很高，因此被譽為支原體檢測金標準。該方法也是《美國藥典》中認可的支原體檢測方法之一。然而，這種方法的缺點是檢測時間太長，支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間。

指示細胞法是將供試品接種于指示細胞（無污染標準化Vero細胞或經國家藥品檢定機構認可的其他細胞，供試品應對該細胞生長無影響）中培養后，用特異熒光染料進行染色，支原體中的核酸也可以被著色。該方法的優點是操作規范的情況下，很少出現假陰性結果，檢測精確度很高。

此外，還有核酸法、化學發光法等支原體檢測方法。其中，PCR法是目前最常用的方法，其原理是在支原體16S rRNA基因的保守區設計引物，通過檢測支原體DNA來檢測細胞中有無支原體的污染。如果有支原體的存在，則在瓊脂糖凝膠電泳或者熒光定量擴增時，就可以檢測到。這種方法的優點是檢測靈敏度高、特異性好、檢測速度快。

德國MB公司生產的Venor?Gem qEP，符合歐洲藥典EP、美國藥典USP、日本藥典JP、中國藥典等各國藥典要求，可在細胞和生物制品，如Car-T、細胞免疫、抗體藥、疫苗等項目中，替代培養法進行支原體檢測。高特異性！一次檢測即可涵蓋，所有可能感染細胞的支原體物種。高靈敏度！檢測限可達≤10CFU/ml。