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PCR檢測實驗室如何避免的假陽性問題出現

2023-12-20 14:58
文章附圖

PCR檢測實驗室的假陽性問題主要是由于引物設計不合適、靶序列或擴增產物的交叉污染等原因導致的。

為避免假陽性問題的出現,可以采取以下措施:

引物設計要合適,需選擇擴增序列與非目的擴增序列無同源性的引物,并避免選擇靶序列太短或引物太短的情況。

避免交叉污染,包括整個基因組或大片段的交叉污染和空氣中的小片段核酸污染。操作時應小心輕柔,防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。除酶及不能耐高溫的物質外,所有試劑或器材均應高壓消毒。所用離心管及樣進槍頭等均應一次性使用。必要時,在加標本前,反應管和試劑用紫外線照射,以破壞存在的核酸。

在PCR分區中,應設置試劑準備區、樣本處理區、擴增區、產物分析區,并確保各分區之間的良好通風。

如果基層PCR實驗室沒有正負壓系統,則要求不同試驗區域保持良好的通風,且通風口不能朝向對側試驗區域。

盡量采用巢式PCR方法來減輕或消除假陽性。

遵循以上措施,PCR檢測實驗室的假陽性問題可以得到有效控制。

締一生物科技提供的德國MB 產品PCR儀器校正試劑(預分裝法)PCR Cycler Check Advance(高階版)貨號:57-2102

57-2102.jpg

PCR儀器校正試劑(預分裝法)PCR Cycler Check Advance說明

為保證PCR試驗數據準確,PCR儀器應定期校正。

PCR Cycler Check?是用于檢測校正PCR儀的試劑盒。

此試劑盒采用對溫度敏感的PCR試劑來監測PCR儀溫度變化。

其中的引物序列經巧妙設計,能夠對溫控偏差、溫度均一性、溫度準確性和耗時極為敏感。溫度偏差超過2℃PCR的擴增反應即完全停止。

模板濃度也經過預先設計,只在PCR反應高效時才進行擴增,這也反映了溫控的準確性。

此試劑盒常規PCR儀和熒光定量PCR(qPCR)儀均適用。

PCR儀器校正試劑(預分裝法)PCR Cycler Check Advance特點

預混凍干粉已分裝于PCR 8連管中。

適用范圍

用于科研實驗室和工業質控實驗室,

以判斷是否能達到以下法規對儀器的性能要求,

如:GLPGMPISO 17025ISO13485ISO/TS 20836EN 45001