熒光定量PCR儀校準方法

熒光定量PCR分析儀的校準方法主要包括以下步驟：

溫度示值誤差校準：利用精密溫度計對PCR儀的熱巢進行實際溫度測量，再將其與PCR儀顯示溫度進行比較，從而得到溫度示值誤差。

溫度均勻度校準：通過在熱巢內不同位置放置多個溫度傳感器，測量各點的溫度差異，以評估溫度均勻性。

溫度波動度校準：在PCR儀完成一輪PCR程序后，測量熱巢溫度的波動情況，以確定溫度波動度。

光學系統物理方法校準：包括Ct值示值誤差、Ct值均勻度、Ct值精密度、通道峰值高度一致性、線性靈敏系數、溶解溫度漂移和溶解溫度比等項目。利用標準品進行熒光定量PCR實驗，根據標準曲線對擴增基因進行定量分析，從而得到各項目的校準結果。

熒光強度精密度校準：通過在一定時間內多次記錄熒光信號強度，分析其精密度。

樣本精密度校準：利用不同樣本進行多次熒光定量PCR實驗，分析樣本的精密度。

熒光線性相關性和樣本線性相關性校準：通過分析熒光信號強度與樣本濃度之間的線性關系，得到熒光線性相關性和樣本線性相關性。

以上信息僅供參考，具體的校準步驟可能因儀器型號和生產商而有所不同。如果您需要更詳細的信息，建議參考儀器說明書或聯系生產商的技術支持團隊。

締一生物提供的德國MB   熒光定量PCR儀器 檢查Kit   qPCR Cycle Check

熒光定量PCR儀器 檢查Kit原理

qPCR Cycle Check試劑盒是用于檢查驗證熒光定量PCR儀的有力工具。它通過對溫度敏感的PCR反應來監測熒光定量PCR儀的溫度變化。它采用的引物/探針的序列經巧妙設計，能夠對溫控偏差、溫度均一性、溫度準確性和耗時極為敏感。溫度偏差超過2℃，qPCR的擴增反應即完全停止。它采用常規的qPCR程序，模板的濃度也經過預先設計，只有在qPCR高效時才進行擴增。

背景

PCR結果假陰性或出現非特異性擴增，可能是因為存在PCR儀缺陷。對于GLP（良好實驗室規范）實驗室，對這兩種情況都需要重視。對于正在使用的PCR儀，要保證其正確的溫度控制，這通常是一項費力的任務，并且要使PCR儀符合質量管理體系的要求并不容易。

盡管可購買溫度傳感器，或者有外界提供溫度均一性的檢測服務，但這種檢測并不一定反映PCR儀所有需要控制的參數，因而無法提供可靠的PCR結果。只有設定參考標準才能調查所有相關的過程參數。

qPCR Cycler Check專為驗證qPCR儀而設計，以保證儀器的安裝合格（IQ）、運行合格（OQ）和性能合格 （PQ）。

熒光定量PCR儀器 檢查Kit應用領域

適用于科研實驗室和工業質控實驗室，可滿足GLP、ISO 17025、 ISO 13485、ISO/TS 20836規范要求。

優勢

無須額外的設備和軟件

適用于任何可檢測FAM和ROX熒光通道的qPCR儀

包含所有必需的反應試劑，如凍干型驗證反應混合物、復水緩沖液、對照反應混合物。探針帶FAM和ROX標記。