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剛購買的細(xì)胞需要注意哪些問題

2023-11-10 15:59
文章附圖

細(xì)胞培養(yǎng)是生物研究的基礎(chǔ),也可以說細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果決定著之后的研究成敗。那剛購買收到的細(xì)胞需要注意什么呢?

1.新買的或惠贈的細(xì)胞如何處理?

不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞,剛拿到手應(yīng)趕緊做這幾件事:檢測瓶子是否破裂;培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁;是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存。

2.能否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基?

不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活。

3.購買的細(xì)胞死亡或存活率不佳可能原因?

常見原因可能有:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;培養(yǎng)箱氣體濃度達(dá)不到要求;細(xì)胞置于80 ℃ 太久。

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胎牛血清第1次解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。

為保證更好的細(xì)胞培養(yǎng)效果,血清和培養(yǎng)基的配制,應(yīng)遵循現(xiàn)用現(xiàn)配原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。

血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。