如何準備用于生長促進曲線測定的細胞

　　要進行細胞生長曲線的測定，來反映FBS的功能，需要先準備足夠的有活力的細胞。威正翔禹/締一生物根據美國藥典（USP）的描述分析如何準備用于生長促進曲線測定的細胞。

　　用37℃水浴快速解凍一管FBS。計數細胞并觀察活力。用添加FBS的完全培養基在37℃培養細胞，具體遵循ATCC對相應細胞提供的指導。鏡下觀察，保證細胞均一分布，貼壁或懸浮接近長滿。細胞再傳代，直至培養的細胞數足夠用于檢測（總細胞數需要1X10⁷個，活力大于90%）。

　　收獲細胞時，先棄掉上清，用不含FBS的培養基沖洗；對貼壁細胞，加1 mL of Trypsin/EDTA消化，必要時用1ml不低于10%FBS的培養基中和。離心，棄上清，細胞重懸。此時，細胞即可用于接種。

　　接種細胞時，應測試**的接種密度，起始密度范圍為2×10³~2×10⁴活細胞/mL。選取至少5個時間點，3個復孔，以確定細胞**接種密度。在37℃，5%CO2的培養箱孵育。對7天內的每個時間點的培養細胞進行拍照（第0,1,2,3,4,7天）。應采用待測試的血清和USP的參考血清，測試三種血清濃度。記錄下每種條件下細胞的匯合度。在預定的時間點上收獲細胞。對細胞總數和活力進行計數。

　　綜上所述，您是不是已經對如何準備用于生長促進曲線測定的細胞，有所了解。如果還有其他疑問，請咨詢威正翔禹/締一生物資深專家免費熱線：400-166-8600。