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用數據證明,胎牛血清依舊是“金標準”

2022-08-11 16:59來源:締一生物

關于胎牛血清的爭論


胎牛血清(FBS)長期以來一直是哺乳動物細胞培養補充劑的黃金標準,廣泛應用于細胞生物學,而細胞生物則是疫苗、抗體、細胞信使RNA和各類細胞療法的基礎。


但有關胎牛血清的使用,一直都存在爭議

添加胎牛血清(FBS)用于生產細胞衍生藥物產品的安全問題引發了人們對替代胎牛血清的呼吁。


有科研人員建議用合理的替代生長補充劑來生長人類細胞而不是FBS。人類血小板裂解物已經用于干細胞擴增,但如何**地獲取這些裂解物還存在問題;一些以血清為基礎的胎牛血清替代品已經取得了一些良好的結果,但這些替代品仍然是以動物為基礎的。


進一步的研究表明,雖然一些人類干細胞可以通過一些胎牛血清替代療法在體外維持一段時間,但也有研究提到:與胎牛血清相比,血清替代法在支持多能干細胞擴增和分化方面的能力較弱。


那么,胎牛血清究竟能否被替代?


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血清 VS 各類替代物


此前,有人對FBS的用以下四個替代品進行了比較:


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(價格為2018年美國本土購買價格,不包含運費稅費成本及其他相關費用)


研究人員先用含有10%FBS的培養基中培養內皮細胞系(C2BBe1)和神經元細胞系(SH-SY5Y),在細胞接近匯合時,進行劃痕實驗,在接下來的25天內逐步將FBS替換為上述替代品。然后然后對細胞進行染色、計數并比較細胞活力、細胞遷移和以及立體生長情況。


那么實驗結果是怎樣的呢?


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與含10%FBS相比,C2BBe1細胞系根本無法在10%替代物C中正常增殖,但在10%替代物B?或10%替代物D中卻生長良好。


使用SH-SY5Y細胞,只有替代物B才能達到FBS的功效。SH-SY5Y細胞在這些替代物中的生長、增殖狀況,均低于11種不同品牌的FBS(陽性對照)


即便是由血小板衍生的替代物D在非FBS生長補劑中效果相對較好,似乎是**的,但也僅是使細胞增殖,而不能誘導細胞生長為立體的球狀。與FBS相比,細胞的生長也仍然較慢。


總結


三類FBS替代品:


  1. 無血清和無異種物質,化學成分明確:替代物C;

  2. 人血小板裂解液:替代物D;

  3. 兩種混合純化生長因子的新生牛血清產品:替代物A、替代物B。

其中替代物C對實驗所用到的細胞系的效果最差。替代物B和替代物D效果相對較好,至少與FBS培養條件下,內皮細胞系的性能接近(在細胞傳代2周的情況下)。但這兩種非FBS生長補充劑在第3周的第3次細胞傳代時也出現了問題。


因此,該研究可看出,FBS目前還沒有找到完美的替代品,大多數細胞生物研究的黃金標準營養添加物仍然是胎牛血清。


參考文獻:

Human Cells Grown With or Without Substitutes for Fetal Bovine Serum - John E. Piletz, Jennifer Drivon, John Eisenga, Will Buck, Sabrina Yen, Megan McLin, William Meruvia, Carolina Amaral, Kellie Brue, 2018 (sagepub.com)


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