產品目錄
  • 細胞培養進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產品
    DNA污染監測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測
歡迎來到 威正翔禹|締一生物官方網站|咨詢熱線:400-166-8600
咨詢熱線
400-166-8600

產品目錄
  • 細胞培養進口血清
    進口胎牛血清
    進口新生牛血清
    進口豬血清
    馬血清
  • 支原體檢測盒及標準品
    常規PCR檢測試劑盒
    熒光定量PCR檢測(qPCR法)
    支原體DNA提取
    靈敏度標準品(方法驗證用)
    特異性標準品(方法驗證用)
    PCR定量標準品(可用于方法驗證)
  • 支原體祛除試劑
    細胞中支原體祛除
    環境支原體祛除
    水槽支原體祛除
  • 干細胞培養基
  • DNA/RNA污染祛除
    DNA/RNA污染祛除試劑
    DNA污染監測
  • RNA病毒研究試劑
    RNA病毒檢測試劑盒
    病毒RNA提取
  • PCR儀器及配套產品
    DNA污染監測祛除
    PCR/qPCR儀性能檢查
    PCR試劑
    PCR試劑盒
    PCR預混液(凍干粉)
    熱啟動聚合酶MB Taq DNA
  • 微生物PCR檢測
    食品檢測類產品
    食品微生物檢測
    細菌PCR檢測

干貨分享:細胞轉染全攻略(上)

2022-05-27 18:39來源:威正翔禹|締一生物

細胞實驗/ 轉染

圖片


定義:細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。


分類:

按轉染途徑可分為:細胞轉染分為物理介導、化學介導和生物介導三類。

按轉染結果可分為:瞬時轉染和穩定轉染


應用:在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗中。


總結:轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。

1

不同轉染途徑的比較


1.物理介導:電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例。

2.化學介導:方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術。

3.生物介導:方法有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。


理論上,最理想的細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。病毒介導的轉染技術,目前看來,雖然轉染效率最高、細胞毒性低,但整個過程比較復雜復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性。


因此,無論采用哪種轉染技術,想要獲得**的轉染結果,都需要對轉染條件進行一定的優化。


影響轉染效率的因素很多,從細胞類型、細胞培養條件和細胞生長狀態,到轉染方法的操作細節,都需要考慮。


三種轉染方法的優劣都給大家準備好了,有需要的同學可以截圖保存。

圖片
圖片
圖片

2

不同轉染結果的比較


瞬時轉染(transient transfection)


外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其他調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24~72h小時內(依賴于各種不同的構建)分析結果,常常用到一些報告系統和熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫助檢測。


穩定轉染(Stable transfected)


外源DNA既可以整合到宿主細胞中,也可能作為一種游離體(episome)存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小,大約1/104轉染細胞能整合,通常需要通過一些選擇性標記。如來氨丙基轉移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素磷酸轉移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反復篩選,得到穩定轉染的同源細胞系。


血清在細胞培養過程中的重要性不言而喻:


  • 提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

  • 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質活力。

  • 有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。

  • 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

  • 起酸堿度緩沖液作用。

  • 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

  • 參與細胞凍存。

    ......


一款優質的血清,絕對能成為細胞實驗的“最強輔助”。


Ausbian進口特級胎牛血清與市面上其他品牌血清相比,有獨特優勢:

圖片


1. 精選內毒素更低批次(≤3EU/ml),原裝進口。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。

2. 新批次在試用前,提供試用服務,養細胞更放心。

3. 每個批次產量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優先鎖定,保證大多數項目兩年不需換批次,細胞試驗數據穩定。

4. 每年按廠家生產順序,會有多批次平行供應,每個實驗室專屬批號管理,保證供貨穩定。

5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類項目的申報提供支持。(同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面,提供更多免費延伸性技術幫助)。

6. 針對特殊科研項目,可提供3-5個平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務,為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時發貨。

8. Ausbian血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復凍融。

9. 免費真品保障,每個血清瓶身加貼Viansaga?易破損防偽標簽,Ausbian品牌真品保護,逢假必究,為實驗室做好售后保障。

10. 免費無憂售后,所有實驗室簽收的Ausbian胎牛血清,從簽收日開始計算,一年之內,血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。

11. 免費專業幫助,匯集近二十年,千萬個血清用戶細胞培養經驗,為各種細胞培養提供問題梳理分析,解決方案參考。

12. Ausbian品牌擁有全系列血清產品線:

特級胎牛血清、細胞治療專用胎牛血清(貨號:WS500T(紅點)),透析胎牛血清 (貨號:VS500TZ   )等多系列產品,服務更專業更精準。


如果你對本公司產品感興趣,想要了解更多,歡迎訪問

北京締一生物官網:

www.dyshengwu.com

上海威正翔禹生物網站:

13851990668.com

或聯系北京締一生物公司

咨詢熱線:

400-166-8600

010-84118494

021-64186645

13811167915

咨詢QQ: 1580434811

咨詢QQ: 1258888686

客服郵箱:servicebj@viansaga.com

客服郵箱:servicesh@viansaga.com



聲明:本網站所有注明“來源:締一生物”的內容,版權均屬于北京締一生物網站所有,受到知識產權的法律保護。如需引用、轉載,須注明來源及原文鏈接。如內容涉及實質性修改,須來電獲取書面授權,且轉載時,須注明“來源:締一生物”。

最終解釋權歸締一生物所有。