透析胎牛血清的妙用

血清是細胞培養過程中常用的生物試劑，市面上有很多種類的血清，今天就來給大家介紹其中的一款——透析胎牛血清。

透析胎牛血清是采用透析的方法，過濾去除10KD以下的小分子（如氨基酸、核苷：次黃嘌呤和胸腺核苷等、膽固醇等），而保留血清中的大分子成分，因而可用于一些特定的細胞實驗，比如：需要避免細胞培養基中一些小分子干擾的實驗。

那么，透析胎牛血清具體適用于實驗中有哪些常見場景？我們來詳細講講。

使用放射性標記小分子，對生物合成過程進行監測，以研究蛋白質等大分子的生化性質、合成、加工、細胞內傳送、分泌和降解過程。這時，常將細胞放在含有充足養分和放射性標記氨基酸（如35S標記的蛋氨酸或半胱氨酸）的培養液中進行標記。

為避免外源未標記的氨基酸的干擾，這時所用的血清就是透析胎牛血清，不含蛋氨酸和半胱氨酸，基礎培養基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。

這種方法常見于生化代謝調控與疾病的機理研究。其他常見標記物包括14C標記的絲氨酸、亮氨酸、纈氨酸或32P標記的焦磷酸，這時培養液中的基礎培養基和胎牛血清都要求不含有這種小分子。

另一種需要用到透析胎牛血清的情況是穩定轉染的細胞株的篩選。

最常見的基因工程用細胞株是二氫葉酸還原酶缺陷型（DHFR-）的CHO細胞。

CHO（DHFR-）細胞由于不含DHFR，因而只能在含有胸苷、甘氨酸和次黃嘌呤的培養基中才能生長。若將DHFR基因導入這種缺陷型細胞，則細胞能在不含這三種分子的培養液中生長。同時，加入氨甲喋呤（MTX）可刺激DHFR基因大量表達，與之一同轉染的外源基因就能大量表達，因而可以獲得人們所需的基因工程藥物。類似的情況也見于雜交瘤細胞的篩選。

這時的胎牛血清由于不含有次黃嘌呤和胸腺嘧啶等，也常作為選擇培養基的一部分，參與陽性轉染細胞克隆的篩選。

采用報告基因檢測系統（常見熒光素酶作為報告基因）進行基因調控的研究時，為避免特定外源小分子（如激素等）作為基因激動劑的干擾，即需要透析胎牛血清來培養基因轉染后的細胞。

Ausbian透析胎牛血清