細(xì)胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——真菌

二、真菌污染

真菌概述

真菌是一類具真核和細(xì)胞壁的異養(yǎng)生物。真菌可以通過孢子延續(xù)種群，典型的營養(yǎng)體為絲狀分支結(jié)構(gòu)。可污染細(xì)胞培養(yǎng)基的真菌種類繁多，最常見的有曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。

真菌污染癥狀

與其他污染相比，真菌污染更容易被觀察到。具體表現(xiàn)為：

• 在培養(yǎng)基中會形成淡黃色或白色的漂浮物，肉眼可見，較易被發(fā)現(xiàn)

• 短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁

• 顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間或是培養(yǎng)基中，有縱橫交錯穿行的絲狀，樹枝狀或管狀菌絲

• 多數(shù)菌絲在高倍鏡下可以觀察到鏈狀排列的菌株，而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形，散落在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長。

真菌污染的鑒定

將待檢測的細(xì)胞培養(yǎng)基，接種在真菌專用培養(yǎng)基上進(jìn)行鑒定，例如：馬丁培養(yǎng)基、沙氏培養(yǎng)基等。

真菌污染的處理方法

首先應(yīng)盡快把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開，不要打開培養(yǎng)皿，以免孢子飛出；

同時需要對實驗過程中所用的器材、試劑和操作空間做相應(yīng)處理：消毒液噴灑、紫外線消毒、高溫滅菌等；

高濃度的抗生素或是抗菌素（兩性霉素 B 、泰樂菌素等）對細(xì)胞會產(chǎn)生一定毒性，在使用前可以進(jìn)行劑量反應(yīng)實驗確定影響；

跟細(xì)菌污染的處理方法類似，通常情況下，霉菌污染的細(xì)胞，如果不是特別珍貴，建議直接丟棄。