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血清滅活之爭？一篇答疑解惑！血清使用小技巧（二）

2021-09-23 11:08來源：威正翔禹|締一生物

關于血清滅活的問題由來已久。很多同學找到我們，詢問血清到底要不要滅活、如何滅活的問題。今天，就在這里跟大家好好嘮嘮，關于血清滅活的那些事。


一、血清滅活指的是什么？


一般情況下，血清的滅活就是將解凍后的血清（還不知道血清該怎樣解凍？快來戳戳這里有詳細講解：血清使用小技巧 | 如何保證血清活性？解凍和儲存方法很重要！），通過水浴加熱的方式來處理，達到滅活補體的目的，溫度和時間控制在如下范圍：


56℃加熱30分鐘

或

40℃加熱20分鐘


因此，買到手的血清究竟要不要滅活，主要考慮血清中的補體對于細胞培養(yǎng)以及后續(xù)實驗是否產(chǎn)生影響。下面就來簡單講講，補體與細胞培養(yǎng)的關系。



二、補體對細胞培養(yǎng)的影響？


補體是一種血清蛋白質(zhì)，存在于人和脊椎動物血清及組織液中，不耐熱，可組成龐大的補體系統(tǒng)，可介導免疫應答和炎癥反應。激活的補體參與溶解細胞過程，刺激平滑肌收縮、細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。

因此，如果你的實驗涉及以下這些情況時，建議去除血清可能帶來的補體系統(tǒng)的干擾。


1

免疫學研究

2

誘導胚胎干細胞分化

3

利用昆蟲細胞研究病毒感染

4

培養(yǎng)平滑肌細胞

5

其他補體參與的細胞培養(yǎng)過程


血清的**工作溫度一般是在37℃左右，所以熱滅火對于血清而言，也是一種不小的傷害，會導致一些營養(yǎng)成分流失，進而影響細胞狀態(tài)。


那么，市面上的血清都含有補體嗎？都需要進行熱滅活嗎？隨著研究的深入，網(wǎng)上也有一些人表示，胎牛血清無需熱滅活，這究竟是真是假？接下來就給大家揭示其中奧秘。



三、血清滅活疑云？


首先我們要明晰一點，按照牛發(fā)育情況，大體上，血清可以分為胎牛血清、新生牛血清、小牛血清和成牛血清。

其中，正規(guī)的胎牛血清，要求對5-8月胎齡（一般牛在10個月左右足月，后自然分娩）的胎牛采用心臟穿刺的方法采血，隨后進行其他制備步驟，得到胎牛血清。因此：


靠譜的胎牛血清

沒有形成一個完整的補體系統(tǒng)，不會真正地干預免疫！


所以，網(wǎng)傳的正規(guī)胎牛血清無需熱滅活的說法，是正確的，正常使用即可。



四、特殊情況


但有一點需要注意，如果你的實驗涉及到一些其他特殊的神秘活性物質(zhì)，必須要滅活，根據(jù)血清廠家多年來總結(jié)的經(jīng)驗，常規(guī)解凍后，40℃水浴加熱20分鐘即可，能夠**程度地保留營養(yǎng)成分。


今天的血清使用小技巧的分享到這里就結(jié)束了，希望能給各位老師同學帶來一點點幫助。



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