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支原體為什么能吸附在細胞表面

2021-01-29 09:28來源:威正翔禹|締一生物


什么是支原體?

支原體是大小在0.1~0.3μm的一種原核單細胞生物。由于沒有細胞壁,它具有多形性,可表現(xiàn)為桿狀、絲狀、球狀等多種形狀。它容易吸附在真核細胞表面,和真核細胞交換物質(zhì)成分,引發(fā)細胞應(yīng)激狀態(tài),干擾正常基因表達。

由于支原體是細胞培養(yǎng)過程中常見的干擾物,我們應(yīng)當(dāng)對它了解更多,以利于更好地祛除支原體污染。


支原體感染細胞并進行寄生,以獲得必要的營養(yǎng),**步是對細胞的吸附。那么支原體為什么會吸附在細胞膜上呢?


原來支原體表面的確存在一些粘附細胞器,參與對細胞的吸附。由于支原體物種有150多種,其粘附機制可能各不相同。下面以肺炎支原體為例,簡要列舉其中的幾種粘附分子(其中有的是細胞骨架蛋白):

P1蛋白

P30蛋白

P65蛋白

HMW1蛋白

HMW2蛋白

HMW3蛋白


這些粘附蛋白的具體位置如下圖所示。


圖片來自:Krause DC and Balish MF, 2004. Cellular engineering in a minimal microbe: structure and assembly of the terminal organelle of Mycoplasma pneumoniae. Mol. Microbiol. 51(4):917-924.


支原體的粘附細胞器是一種極性結(jié)構(gòu),它可使支原體與宿主細胞結(jié)合,并參與支原體的分裂以及滑行運動。

那么,這種粘附細胞器的受體主要是宿主細胞的什么分子呢?主要是唾液酸糖蛋白。紅細胞表面富含這種蛋白,因此支原體常表現(xiàn)為血吸附陽性。


由于支原體容易吸附在宿主細胞表面,因此當(dāng)存在支原體污染時,如果細胞不愿意丟棄(如已轉(zhuǎn)染,已體外刺激或已費力擴增的細胞),希望繼續(xù)培養(yǎng),這時可使用德國MB的支原體祛除劑Zell Shield?,采用下面的“懸浮沖洗法”進行支原體的祛除。

一、產(chǎn)品信息


中文品名:支原體祛除劑(培養(yǎng)基用)

英文品名:Zell Shield?

廠家:德國Minerva Biolabs公司

貨號:13-0050

規(guī)格:50ml/瓶

用途:預(yù)防和祛除細胞培養(yǎng)中的支原體


二、產(chǎn)品特點


1) 高效廣譜

Zell Shield?不僅對抑制支原體有效,也對抑制霉菌、酵母、細菌有效。因此加入Zell Shield?后,無須再加其他抗生素(如青/鏈霉素、制霉菌素、兩性霉素B)。

2) 安全

無細胞毒性,同時適用于細胞系和原代細胞。Zell Shield?對內(nèi)毒素檢查無干擾,也不影響質(zhì)粒轉(zhuǎn)染或病毒包被。

3) 活性穩(wěn)定

在細胞培養(yǎng)期間,Zell Shield?始終保持穩(wěn)定的活性。

4) 使用方便

Zell Shield?為即用型100×溶液,可直接加入培養(yǎng)基使用,終濃度為1%即可。


三、懸浮沖洗法 + Zell Shield?祛除支原體污染


據(jù)研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體比細胞小很多,經(jīng)低速離心可與細胞分離。通過反復(fù)懸浮沖洗細胞、離心,加上使用Zell Shield?,即可在細胞培養(yǎng)四代以內(nèi)有效地祛除支原體。

具體流程如下圖:

希望以上信息能給你帶來幫助。