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血清對(duì)背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用

2020-12-22 16:24來(lái)源:威正翔禹|締一生物

背根神經(jīng)節(jié)是位于脊椎間孔內(nèi)、靠近脊髓的神經(jīng)結(jié)節(jié)。它負(fù)責(zé)向脊髓傳遞各種感覺(jué)信號(hào),如溫度覺(jué)、觸覺(jué)、痛覺(jué)等。


背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的體外培養(yǎng)可用于研究神經(jīng)軸突再生,從而有助于脊髓損傷的治療。

在研究神經(jīng)軸突再生機(jī)制時(shí),電穿孔轉(zhuǎn)染siRNA 或質(zhì)粒是一種重要的研究方法。

對(duì)于神經(jīng)元細(xì)胞,電傳孔轉(zhuǎn)染效率顯著高于其他方法,但對(duì)細(xì)胞可能有一定損傷。

2020年9月,《中國(guó)組織工程研究》期刊在線發(fā)表了《無(wú)血清培養(yǎng)基和有血清培養(yǎng)基對(duì)背根神經(jīng)節(jié)生長(zhǎng)的差異》的研究,揭示出在電轉(zhuǎn)條件下,血清對(duì)背根神經(jīng)節(jié)的體外培養(yǎng)有重要作用,因此無(wú)血清培養(yǎng)基無(wú)法取代有血清培養(yǎng)基。

該研究即將刊登在2021年第13期的紙質(zhì)版期刊上。


研究人員取出小鼠的背根神經(jīng)節(jié)組織,用膠原酶消化后,分別用含5%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基和無(wú)血清的MEM培養(yǎng)背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。


同時(shí),用電傳孔方法轉(zhuǎn)染增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(EGFP) 質(zhì)粒至細(xì)胞內(nèi)。


培養(yǎng)3天后,觀察在光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀況,并進(jìn)行神經(jīng)元標(biāo)志物染色,在熒光顯微鏡下觀察,并測(cè)量軸突長(zhǎng)度。


結(jié)果顯示:


1在電轉(zhuǎn)和非電轉(zhuǎn)條件下,無(wú)血清并不影響背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的軸突再生的長(zhǎng)度和軸突的分支。

圖片

2在電轉(zhuǎn)的條件下,背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的存活數(shù)均減少,且電轉(zhuǎn)無(wú)血清組的細(xì)胞存活數(shù)比電轉(zhuǎn)有血清組明顯減少。

3無(wú)論是否有血清,電傳孔傳染效率均為20%左右。


該研究揭示出,電轉(zhuǎn)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞存在一定的損傷,但血清對(duì)細(xì)胞有明顯的保護(hù)作用。該結(jié)論也可能適用于其他細(xì)胞類型。

Ausbian?特級(jí)胎牛血清被各大科研院所、高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室及藥廠廣泛使用,多年來(lái)持續(xù)穩(wěn)定供應(yīng)細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目。


Ausbian?血清的優(yōu)勢(shì)如下:

1. 精選內(nèi)毒素更低批次(≤3EU/ml),使細(xì)胞更健康。尤其滿足干細(xì)胞、基因敲除、原代培養(yǎng)、細(xì)胞典藏、長(zhǎng)期傳代等各類細(xì)胞的培養(yǎng)要求。

2.每批次產(chǎn)量為1500瓶-2500瓶,保證大多數(shù)項(xiàng)目?jī)赡瓴恍钃Q批次,細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

3. 每年按廠家生產(chǎn)順序,會(huì)有多批次平行供應(yīng),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室專屬批號(hào)管理,保證供貨穩(wěn)定。

4.出廠前嚴(yán)格質(zhì)控,具有完整的檢測(cè)報(bào)告,為各類項(xiàng)目的申報(bào)提供支持。


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