在疫苗生產(chǎn)、生物制藥和細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中,支原體污染的預(yù)防和祛除,是保證生產(chǎn)質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)順利的重要環(huán)節(jié)。
在全球支原體檢測(cè)和祛除領(lǐng)域中,近二十年一直排名首位的,是一家位于德國(guó)柏林郊外的生物廠家——德國(guó)Minerva Biolabs公司(簡(jiǎn)稱德國(guó)MB)。
全球眾多的大型生物藥廠以及數(shù)不過(guò)來(lái)的生物實(shí)驗(yàn)室,大部分預(yù)防、檢測(cè),祛除支原體的產(chǎn)品,均都來(lái)自于這家MB公司。
上一期,我們已經(jīng)為大家介紹了MB家族全套的『支原體檢測(cè)產(chǎn)品系列』,其中包括熒光定量PCR方法的檢測(cè)試劑盒,以及可做方法學(xué)驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)品等。
而本期文章,我們將把MB品牌的『支原體祛除和預(yù)防系列』產(chǎn)品,簡(jiǎn)明扼要地介紹給大家,希望對(duì)疫苗生產(chǎn)、生物制藥、細(xì)胞治療、CAR-T等項(xiàng)目的質(zhì)檢質(zhì)控,以及更多實(shí)驗(yàn)室的科研工作者,能有所幫助。
本文共分三個(gè)部分:
一,細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),可加入培養(yǎng)基中的支原體清除劑。
工作區(qū)域中支原體污染的清除系列,同時(shí)對(duì)細(xì)菌、病毒、真菌、霉菌都有效。
三,預(yù)防培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋中水,不被支原體污染,同時(shí)對(duì)霉菌,孢子,細(xì)菌,真菌都有效的產(chǎn)品系列。
細(xì)胞中支原體的祛除
品名 | 用途和用法 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Zell Shield?支原體祛除劑(培養(yǎng)基用) 英文名:Zell Shield? 品牌:德國(guó)MB | 1. 適用范圍 (1)細(xì)胞已發(fā)生支原體污染,但又不愿丟棄,希望繼續(xù)培養(yǎng)(如已轉(zhuǎn)染或大量擴(kuò)增的細(xì)胞)。 (2)初始培養(yǎng)的原代細(xì)胞。 (3)存在支原體污染高風(fēng)險(xiǎn)的細(xì)胞。 2. 用法: (1)1:100加入培養(yǎng)基。 (2)當(dāng)細(xì)胞存在支原體污染時(shí),應(yīng)先對(duì)細(xì)胞懸浮沖洗三次,再用含Zell Shield?培養(yǎng)基培養(yǎng)。每次傳代前都應(yīng)做懸浮沖洗處理。連續(xù)傳代4次,支原體即可祛除。 | 13-0050 | 50ml/瓶 |
13-0150 | 50ml×3瓶/盒 |
Mynox? Gold支原體祛除劑 (珍貴細(xì)胞保種用) 英文名:Mynox? Gold 品牌:德國(guó)MB | 1. 適用范圍 被支原體污染的珍貴細(xì)胞或不易獲得的生物樣本(如細(xì)胞種子)。
2. 用法: 步驟1. 將「**治療液」加入到4.5ml培養(yǎng)基(FBS需≤5%)中,培養(yǎng)細(xì)胞(細(xì)胞數(shù)為104~105)。 步驟2. 細(xì)胞長(zhǎng)至80%-90%匯合時(shí),細(xì)胞傳代。將1管「鞏固防護(hù)液」加到9.5ml培養(yǎng)基中,用該培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。 步驟3. 重復(fù)步驟2,細(xì)胞再傳代2次,支原體即完全祛除。 注意:每次傳代時(shí),**都能把細(xì)胞懸浮沖洗三次,可取得更好的治療效果。 | 10-0201 | 2套/盒 |
10-0501 | 5套/盒 |
10-1001 | 10套/盒 |
Mynox支原體祛除劑 (珍貴樣本用) 英文名:Mynox? 品牌:德國(guó)MB | 1. 適用范圍 被支原體污染的珍貴細(xì)胞、不易獲得的生物樣本或病毒收獲液(特別是不能長(zhǎng)期培養(yǎng)的樣品)。
2. 用法: (1)對(duì)于貼壁細(xì)胞: 步驟1. 培養(yǎng)皿中加入200μl Mynox?和 2.8ml培養(yǎng)基中(FBS≤5%),混勻。 步驟2. 再加入2ml細(xì)胞(細(xì)胞數(shù)為104~105,培養(yǎng)基中的FBS需≤5%)。 步驟3. 細(xì)胞培養(yǎng)2小時(shí),棄上清,換用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)4代即可。
(2)對(duì)于懸浮細(xì)胞: 步驟1. 在離心管中加入200μl Mynox?和1.6ml胰酶(0.125 %,5 mM EDTA in PBS),混勻。 步驟2. 加入1.6ml細(xì)胞(細(xì)胞數(shù)為104~105)。 步驟3. 室溫靜置30min。 步驟4. 600×g離心5min。棄上清,換用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)4代即可。 | 10-0200 | 2管/盒 |
二,工作區(qū)域中支原體的祛除
品名 | 用途和用法 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
MB支原體祛除噴霧 英文名:Mycoplasma-OffTM 品牌:德國(guó)MB | 用途:實(shí)驗(yàn)環(huán)境(如實(shí)驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、儀器設(shè)備)、無(wú)菌車間和潔凈生產(chǎn)線的支原體的祛除,對(duì)清除支原體、細(xì)菌、真菌(含真菌孢子)和多種病毒污染均有效。
2. 用法:噴霧劑噴灑待消毒的表面,等待5-10min后,用干凈紙巾擦拭。通風(fēng)2-3分鐘。 | 15-1000 | 1L/瓶 |
15-5000 | 5L/桶(補(bǔ)充裝) |
MB支原體祛除濕巾 英文名:Mycoplasma-OffTM Wipes 品牌:德國(guó)MB | 1. 用途:應(yīng)用于電子設(shè)備、門把手、電話、移液器表面的支原體的祛除,對(duì)支原體、細(xì)菌、真菌(含真菌孢子)和多種病毒均有效。
用法:用濕巾擦拭后,應(yīng)讓被消毒物體的表面保持濕潤(rùn),再讓其自然風(fēng)干。 | 15-1001 | 50抽/筒 |
15-5001 | 50抽/包×5包/袋(補(bǔ)充裝) |
三,培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋中支原體的預(yù)防
品名 | 用途和用法 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
支原體祛除劑(水槽用) 英文名:Water ShieldTM 品牌:德國(guó)MB | 1. 用途:預(yù)防培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋的支原體、細(xì)菌和真菌污染。
2. 用法: 步驟1. 本品按1:200比例加入到蒸餾水中,如1L蒸餾水+5ml Water ShieldTM 步驟2. 加入Water ShieldTM的蒸餾水可直接加入到培養(yǎng)箱水槽或水浴鍋中, 步驟3. 4周左右清洗水槽,換水,重新加入Water ShieldTM。 | 15-3015 | 10mL×15瓶/盒 |
15-3020 | 50mL×3瓶/盒 |
15-3050 | 500mL×1瓶/盒 |
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