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支原體篩查用 qPCR檢測試劑盒

2020-09-28 14:04來源：威正翔禹|締一生物

細胞培養時，支原體污染是一個常見的問題，它會帶來如下危害。

由于支原體污染無法肉眼識別，因此應定期采用試劑盒對細胞培養物中的支原體進行監測。


世界**微生物控制公司Minerva Biolabs開發有Venor? Gem系列的支原體檢測試劑盒（核酸法），靈敏度高，特異性好，廣受科研和工業用戶的歡迎。


其中，Venor?Gem qOneStep，即支原體熒光定量PCR檢測試劑盒(一步法)適用于細胞培養物、細胞培養基及其他生物基質中的支原體污染的篩查（非放行檢測）。


和PCR比起來，qPCR無需跑電泳，使用時更為便捷，對實驗人員更安全。


現對該試劑盒作一簡單介紹:

一、產品信息

二、產品描述

試劑盒包含有1管預混液。預混液內含引物對、核苷酸、內控對照和聚合酶。另含有1管陽性對照DNA。兩管均為凍干粉，使用時復溶即可。整個qPCR檢測小于3小時。


三、產品特點

①內控對照已加在預混液中，無需另外配制，使用便捷。

②高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。

③高靈敏度，至少50個基因組拷貝/反應。


四、操作步驟


第1步：樣本處理

第2步：試劑制備

第3步：qPCR體系建立

第4步：啟動qPCR反應

第5步：結果判別

FAM通道：檢測支原體熒光信號。

HEX通道：檢測內控對照熒光信號。

支原體DNA和內控DNA存在信號的競爭性抑制。

支原體DNA越多，FAM通道信號越高，檢測內控對照的HEX通道信號越低。

定量需基于Ct值和DNA標準曲線。

Ct＜40為陽性結果。Ct≥40為陰性結果。

示意圖：