方法驗證用100CFU?支原體標準品

支原體核酸檢測法（常規PCR、熒光定量PCR）應用于細胞培養、生物制藥工業和細胞治療領域具有很多優勢。和傳統方法比較，它具有

①靈敏度高，特異性好。

②時間短，2-3小時出結果。

③操作簡單等特點，可替代傳統的培養法和DNA染色法。

歐洲藥典（EP 2.6.7）規定，支原體核酸法如要替代【指示細胞培養法】（又稱為DNA染色法），需要驗證核酸法靈敏度達到100CFU/ml，并根據支原體污染發生的頻率，推薦選擇下列9種支原體進行檢測：

• 精氨酸支原體

• 口腔支原體

• 雞敗血支原體

• 肺炎支原體

• 關節液支原體

• 發酵支原體

• 豬鼻支原體

• 萊氏無膽甾原體

• 檸檬螺原體

據小編市場調查后發現，德國MB公司（全稱Minerva Biolabs）生產的【100CFUTM靈敏度標準品】廣泛被國內外各大藥廠用于支原體核酸法的方法學驗證，被稱為該領域的“金標準”。

產品介紹

【100CFUTM靈敏度標準品】為凍干粉形式，一共有10種（見下表），其中涵蓋了歐洲藥典（EP 2.6.7）列舉的9個支原體物種，可用于qPCR和PCR方法的靈敏度以及耐用性驗證，使得核酸法可作為DNA染色法的替代方法。

產品特點

1.來自英國菌種保藏中心NCTC，為標準支原體株。

2.支原體已滅活，不會對實驗室造成污染，保障細胞實驗室安全。

3.傳代次數少，支原體無變異。

4.產品為凍干粉，保證其穩定性。

5.分析證書（COA）提供該批次GU：CFU比值（支原體基因組/菌落數比值）。

注意事項

1.使用時，應嚴格遵循說明書操作流程。任何偏離可能會造成結果誤差。

2.加入100CFU標準品的樣品不能超濾濃縮，否則會導致結果不可靠。

3.標準品不建議稀釋。

使用說明

試劑使用前，先達到室溫平衡。

1.標準品管離心，以收集凍干粉至管底。

2.每管加入1ml樣品基質液。

3.室溫靜置5分鐘。

4.渦旋振蕩10秒鐘，再離心5秒鐘。

5.使用合適體積的標準品用于DNA抽提。推薦使用MB公司生產的支原體DNA提取試劑盒（品名：Venor?GeM Sample Preparation Kit）。

6.使用合適體積的抽提DNA用于PCR擴增。

陰性對照樣品的制備，步驟同上。推薦適當重復試驗，并推薦使用MB公司的常規PCR檢測試劑盒 (品名：Venor?GeM Classic，貨號:

11-1025/-1050/-1100/-1250) 或qPCR試劑盒 (品名：Venor?GeM qEP，貨號:

11-9025/-9100/-9250)。

德國MB公司簡介

德國MB公司，全稱Minerva Biolabs，是世界**的微生物污染控制公司，成立于1999年，

總部位于德國柏林。

公司創始人來自于全球聞名的羅伯特?科赫微生物研究所。

二十年來，MB公司專注于微生物污染檢測與清除，

特別是支原體和軍團菌的技術和產品，在世界上遙遙領先。

自1999年起即研發細胞培養和生物藥工業用QC檢測試劑

配備生物安全二級實驗室

GMP級潔凈車間生產

世界**的支原體PCR檢測試劑供應商

IOM和PDA成員

ISO 9001和ISO 13485認證

注：IOM全稱Institute of Medicine

PDA全稱Parenteral Drug Association