對不同牛齡采血得到的牛血清性能也不同

牛血清是細胞培養(yǎng)過程中重要的培養(yǎng)基，其質(zhì)量的好壞影響著細胞狀態(tài)。常用的牛血清包括胎牛血清、新生牛血清及小牛血清，分別對不同牛齡采血，小牛血清的采集對象是出生1年之內(nèi)的小牛，新生牛血清是出生24小時至2周內(nèi)的新生牛，胎牛血清則是6-10個月的胎牛。

隨著采血年齡的增加，牛血清中的生長因子減少，抗體和補體等含量增加。因此，鑒別血清原料的采血年齡段，防止成牛血清的參入是血清品質(zhì)檢測者所面臨的一個重要問題。

有研究人員通過不同年齡段的牛血清在不同濃度下對SP2/0細胞株培養(yǎng)效果的比較試驗，用**增殖濃度、倍增時間、克隆率等指標來推斷樣品血清的采血年齡段，其結(jié)果如下：

SP2/0細胞株為鼠骨髓瘤細胞。首先，研究人員在無菌條件下，將7個供試血清0.22μm過濾除菌，然后將供試血清按10％、8％、6％、4％、2％的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細胞懸液中使細胞濃度為1×104／ml。充分混勻后在96孔細胞培養(yǎng)板中每孔接種0.2ml，每個試驗樣接種8孔。每24 h記數(shù)一孔，共記數(shù)7d。研究人員又將供試血清按8％的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細胞懸液中，將SP2／0細胞稀釋到5個／mL，分別接種到96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔0.2mL，每個供試血清樣品接種48孔，一周后計數(shù)克隆生成孔數(shù)。

結(jié)果顯示，在克隆率方面，采血年齡越小，效果越好，胎牛血清培養(yǎng)的細胞克隆率為85.4%，6h新生牛血清為79.1%，6月齡小牛血清為50%。在促細胞生長效應(yīng)方面，隨著血清濃度從2%提高到10%，細胞**增殖數(shù)不斷升高，倍增時間縮短。血清濃度相同時，采血年齡約越小，細胞數(shù)最高，倍增時間越短。不同年齡段的牛血清對促細胞生長效應(yīng)的影響呈現(xiàn)比較明顯的差異性。

上海威正翔禹生物公司提供的Ausbian牛血清為澳洲進口，血清經(jīng)過嚴格質(zhì)控，如檢測總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等，并經(jīng)0.22m過濾和gamma射線照射，指標達標，經(jīng)廣泛使用，受到好評。