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THP-4濃縮型培養基4L配置方法

2016-05-28 10:57



THP-4培養基
4升培養基配制方法

包裝
每一個獨立包裝的THP 培養基均包括5個小瓶的液體。
碳酸氫鈉和谷氨酰胺需分別加入。
_____________________________________________________________________
保存
-20°C凍存為**保存狀態。
_____________________________________________________________________
準備
待小瓶中的液體完全融化后,劇烈搖晃小瓶,使瓶中的液體均勻。
配制培養基時,

1. 量出3升常溫的雙蒸水或純凈的組織培養水,并加入到攪拌容器中。攪拌時,加入小瓶中的液體,并用常溫的雙蒸水或純凈的組織培養水沖洗小瓶,以確保瓶中的液體完全倒入攪拌容器中。

2. 加入1號和2號小瓶中的液體,然后,再加入9.0 g的碳酸氫鈉,待其完全溶解后,再進行下列操作。
 建議加入谷氨酰胺的濃度為4mM (即:4升培養基中需加入谷氨酰胺2.3g)。注意:如培養基中谷氨酰胺的水平過高,會導致細胞有毒代謝物的生成。

3. 加入3號、4號和5號小瓶中的液體,并用水量來調節最后的培養基體積。
不必再調節培養基的pH值。 (培養基已經含MOPS緩沖液)!

4. 過濾除菌后,將配制好的培養基置于4-8°C冰箱中避光冷藏。

注意:已過濾除菌且不含谷氨酰胺的培養基配制后的有效期為9個月。不要在大容器中保存少量的培養基,培養基需避光保存。