Vero細胞的培養方式

Vero細胞是世界衛生組織和中國生物制品規程認可的病毒疫苗生產細胞系 。采用 V ero 細胞培養技術生產的病毒疫苗主要包括狂犬病疫苗、脊髓灰質炎疫苗、流感疫苗、乙型腦炎疫苗、出血熱疫苗和手足口病疫苗等。Vero細胞有貼壁特性，很大程度上決定了病毒疫苗的生產是通過Vero細胞的微載體固定化培養而得以實現。

軍科院生物工程所曾比較了四種商品化微載體對Vero細胞生長的影響。他們先取適量的微載體，然后用PBS浸泡過夜，再吸出PBS，用PBS清洗3次，再高壓消毒后，加入含1%新生牛血清的DMEM/F12，放置在37℃培養箱備用。

Vero細胞則按2X105細胞/ml接種培養瓶和轉瓶，再加入含1%新生牛血清的DMEM/F12，置37℃培養箱培養。需要時進行傳代。之后將該細胞作為種子細胞。

然后將固定質量的4種微載體分別移入250mlBellco攪拌式細胞培養瓶。Vero細胞接種后，補足培養基至100ml，設置攪拌速度為30r/min懸浮培養。根據培養基顏色在必要時更換新鮮培養基。

研究人員用顯微鏡觀察細胞形態，并取1ml細胞懸液進行細胞計數以測定Vero細胞密度和活力（儀器采用細胞密度和活力自動分析儀），采用多參數生物分析系統定量檢測細胞培養上清中的葡萄糖、乳酸和谷氨酰胺濃度，因而可測算葡萄糖比消耗速率，乳酸比生產速率等。

微載體固定化培養被廣泛應用于病毒疫苗和重組蛋白藥物生產。結果顯示，在四種商品化微載體中，Cytodex 1微載體（固體實心微球）效果較好，細胞密度高。同時細胞代謝速率在四種微載體中都很接近。研究者還指出，Vero細胞在接種后24h才基本完成貼壁階段。

在該次培養中，新生牛血清用量為1%，雖然用量較少，但仍不可缺少。上海威正翔禹生物公司進口的澳洲產Ausbian精制新生牛血清(γ照射)系新西蘭血源（來自新西蘭政府獸醫管理局監管下的具有出口注冊證的正規屠宰場），GMP標準生產。

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規格：500ml/瓶

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參考文獻

劉紅，等.   Vero細胞在不同微載體固定化培養中的生長和代謝. 現代生物醫學進展. 2012, 12 (36): 7001-7006