Vero細胞的來源及優勢介紹

近年來隨著生物技術的發展，動物細胞培養技術已從簡單的試驗研究拓展到了生物學研究和商業應用領域。生物制品如生物基因工程疫苗、病毒性疫苗、醫學治療性抗體的研究與生產都用到了細胞培養技術。應用較廣泛較安全的動物細胞基質是Vero細胞。Vero細胞是世界衛生組織(WHO)和《中國藥典》認可的疫苗生產細胞系。

Vero細胞(非洲綠猴腎細胞)是日本學者Yasumura和Kawakita兩人在1962年正式從非洲綠猴腎臟分離的，初次用于生產人用生物制品的異倍體貼附依賴性細胞，并建立了細胞系和不同代次的細胞庫。在此之前，對生物制品的研究和生產只允許用原代細胞或二倍體細胞。

二倍體細胞系傳代次數有限，當傳代達到一定代次后就會衰老凋亡，致使生產工藝無法投入到規模化生產。長久以來，人們對將傳代細胞作為生物制品生產基質的考慮和應用很少，因檢測手段有限，對其致瘤性和外源性污染等特性研究不清楚，直到1987年，WHO才正式批準傳代細胞系作為生物制品生產的基質。

Vero細胞被批準用于人用疫苗的生產后，開始生產的人用疫苗是Barrett等[1]生產的脊髓灰質炎滅活疫苗(IPV)，之后Vero細胞用于狂犬病毒疫苗和口服脊髓灰質炎病毒疫苗(OPV)等多種人用疫苗生產。Vero細胞在病毒性疫苗生產的應用已有30年之久，尤其是狂犬病毒疫苗和脊髓灰質炎疫苗。

Vero細胞系廣泛應用于人用疫苗的生產是基于其獨特的特性。Vero細胞因其固有的基因缺陷，不能表達抗病毒蛋白干擾素。Barrett等[1]試圖用新城疫病毒、仙臺病毒、風疹病毒感染Vero細胞生產干擾素，結果表明Vero細胞不能表達分泌干擾素蛋白。然而，在相同條件下，改用BSC-1細胞和其他靈長類動物細胞重復這一實驗時，這些細胞系可以表達分泌大量干擾素蛋白。有文獻報道，Vero細胞可能存在β和α基因的缺陷，不能表達干擾素蛋白[2]。Vero細胞的廣泛易感特性促進了使用Vero細胞生產疫苗事業的發展。

除了以上優勢，與生產生物制品生產用原代細胞系和二倍體細胞系相比，Vero細胞還具有以下優勢：

一、來源方便，容易建立細胞庫和保存，可連續傳代，生長速度快；

二、Vero細胞遺傳性狀穩定，惡性化概率小，無外源性污染，具有良好的生物安全特性；

三、Vero細胞對多種病毒敏感，生產的病毒滴度高；

四、Vero細胞對培養條件要求不高，在微載體表面能良好的貼附生長，易在生物反應器放大培養。

培養基的質量直接關系到疫苗的品質。目前用于Vero細胞的培養基主要有M199、MEM、DMEM等合成培養基。近有報道，HiMedia公司生產的SFRE 199培養基（SFRE 199是在基礎培養基M199的基礎上改良的）也可用于Vero細胞的無血清培養[3]。如下圖所示，分別用添加水解乳蛋白的F-12和SFRE 199-1培養Vero細胞，結果顯示Vero細胞在無血清的SFRE199-1中生長狀態良好。

參考文獻

［1］ Barrett PN，Mundt W，Kistner O，et al． Vero cell platform in vaccine production: moving towards cell culture-based virul vaccines［J］． Expert Ｒev Vaccines，2009，8(5) ，607-618．

［2］ 吳雪伶，袁寶珠． 干擾素系統的完整性與 Vero 細胞病毒敏感性的相關性［C］/ /2012 年中國藥學大會暨第十二屆中國藥師周論文集． 北京: 中國藥學會，2012．

［3］ Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

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