Vero細胞無血清培養基在流感疫苗中的應用

流行性感冒（Influenza）簡稱流感，是由流感病毒（Influenza Virus）引起的急性呼吸道疾病，流感病毒具有高度的傳染性和較強的變異性，每年在全球各個國家呈季節性流行和地區性爆發，甚至世界范圍內流行。

面對流感侵襲，人們主要通過勤洗手、帶口罩或開展公眾教育等措施進行預防，但這些措施并不十分有效。為有避免流感的侵襲，20世紀40年代，人們通過雞胚擴增得到的流感疫苗株，用于人類的流感預防效果顯著。目前，正在使用或正在研發的針對流感的疫苗包括全病毒疫苗、裂解疫苗、亞單位疫苗及冷適應減毒活疫苗仍是使用雞胚為培養基質生產的，然而大流感發生時不斷増長的疫苗和疫情防控需求使雞胚生產平臺中雞胚供應不足、卵清蛋白過敏及產量有限等諸多缺陷越來越明顯。

迫切需要找到一種能快速生產安全有效的流感疫苗的介質，世界衛生組織（WHO）推薦利用哺乳動物細施培養技術替代雞胚培養技術生產流感疫苗。利用細胞培養生產流感疫苗具有顯著的優點：①細胞培養系統操作簡單，可實現大規模培養；②細胞培養系統中繁殖的病毒與原流感病毒分離株的匹配度更高；③雞胚生產的流感疫苗可能引發人體過敏反應，而通過細胞培養制備的疫苗可克服此缺點。

目前可用于流感疫苗生產的細胞系主要有狗腎腫瘤細胞系（MDCK）、非洲綠猴腎細胞系（Vero）、人視網膜細胞系（PER.C6）等。其中Vero細胞系是世界衛生組織（WHO）和我國生物制品規程推薦的人用疫苗生產細胞系，已成功應用于包括流感疫苗在內的多種疫苗的生產，其安全性已得到充分認證。

在疫苗生產過程中，為了獲得高滴度、高質量的病毒液，需要高密度的細胞提供病毒復制的基質，為實現細胞的高密度培養，在體外培養細胞時會添加一定量的血清，血清可提供細胞生長所需的必需營養物質，如貼壁生長因子、激素、微量元素、載體蛋白等。

使用血清也會有很多的不足：①血清容易引起細菌、真菌、病毒及支原體的污染，會增加疫苗生產的安全性隱患；②血清的質量在批次間存在很大的差異，影響疫苗生產工藝的穩定性和疫苗質量控制；③血清成分復雜，含有多種蛋白質、激素、生長因子等，増加疫苗等產品連續純化過程的難度；④血清價格昂貴，在產品規模化生產時會増加放大成本；⑤血清中含有能促進細胞生長的物質，但也含有一些對細胞有毒性作用和抑制作用的物質，影響細胞的生長，血清使用造成的細胞培養過程和疫苗生產的安全性問題及生產成本増加的問題，成為動物細胞無血清培養技術研究和應用的發展動因，因此，基于細胞和產品特性的無血清培養基研制己成為細胞工程領域的重要課題。

  例如：HiMedia公司生產的基礎培養基SFRE系列，是基礎培養基M199的改良款，該系列分為SFRE199-1和SFRE199-2，可用于培養Vero細胞。與M199相比主要區別是提高了葡萄糖和氨基酸的濃度，降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。另外加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚精蛋白鋅胰島素。

SFRE 199-1有Hank's鹽；SFRE 199-2含有Earle's鹽，兩款均不含胰島素，需要使用前自行添加。可無血清培養，與加胎牛血清的常規培養基比較，細胞生長速率、產量和蛋白容量均相同，均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在細胞培養、微生物培養和檢測領域，一如既往地為您帶來優質的服務。

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