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簡(jiǎn)述 Vero 細(xì)胞的應(yīng)用與優(yōu)勢(shì)

2018-12-19 09:30來源:締一生物
文章附圖


Vero 細(xì)胞系廣泛應(yīng)用于人用疫苗的生產(chǎn), 如:輪狀病毒疫苗、流行性乙型腦炎病毒疫苗、流感病毒疫苗、腸道病毒 71 型疫苗等,這是基于其獨(dú)特的特性。Vero 細(xì)胞因其固有的基因缺陷,不能表達(dá)抗病毒蛋白干擾素。Barrett 等試圖用新城疫病毒、仙臺(tái)病毒、風(fēng)疹病毒感染 Vero 細(xì)胞產(chǎn)生干擾素,結(jié)果表明 Vero 細(xì)胞不能表達(dá)分泌干擾素蛋白。



在相同條件下,改用BSC-1 細(xì)胞和其他靈長(zhǎng)類動(dòng)物細(xì)胞重復(fù)這一實(shí)驗(yàn)時(shí),這些細(xì)胞系可以表達(dá)分泌大量干擾素蛋白。有文獻(xiàn)報(bào)道,Vero 細(xì)胞可能存在 β 和 α 基因的缺陷,不能表達(dá)干擾素蛋白。Vero 細(xì)胞的廣泛易感特性促進(jìn)了使用 Vero 細(xì)胞生產(chǎn)疫苗事業(yè)的發(fā)展。


  除了以上優(yōu)勢(shì),與生物制品生產(chǎn)用原代細(xì)胞系和二倍體細(xì)胞系相比,Vero 細(xì)胞還具有以下優(yōu)勢(shì):


**,來源方便,容易建立細(xì)胞庫(kù)和保存,可連續(xù)傳代,生長(zhǎng)速度快;

第二,Vero 細(xì)胞遺傳性狀穩(wěn)定,惡性化概率小,無外源性污染,具有良好的生物安全特性;

第三,Vero 細(xì)胞對(duì)多種病毒敏感,生產(chǎn)的病毒滴度高;

第四,Vero 細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)條件要求不高,在微載體表面能良好的貼附生長(zhǎng),易在生物反應(yīng)器放大培養(yǎng)。


    Vero 細(xì)胞在疫苗的生產(chǎn)從輪狀活病毒疫苗到流感減毒活疫苗,再到滅活全病毒疫苗的發(fā)展都證明 Vero 細(xì)胞在一系列病毒性疫苗發(fā)展中具有重要的價(jià)值。Vero 細(xì)胞被批準(zhǔn)用于人用疫苗的生產(chǎn)后,生產(chǎn)的人用疫苗是 Barrett 等生產(chǎn)的脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗(IPV),之后 Vero 細(xì)胞用于狂犬病毒疫苗和口服脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗(OPV) 等多種人用疫苗生產(chǎn)。Vero 細(xì)胞在病毒性疫苗生產(chǎn)的應(yīng)用已有 30 年之久,尤其是狂犬病毒疫苗和脊髓灰質(zhì)炎疫苗。


  疫苗的作用主要是預(yù)防傳染性疾病、新型流行病及暴發(fā)流行,尤其如乙型肝炎呈世界流行,是全球性的健康問題。健康人群是主要的接種對(duì)象,因此,保證疫苗的質(zhì)量和安全性是重要的問題,其關(guān)鍵在于做好生產(chǎn)方式和過程的把關(guān),保證生產(chǎn)用原材料的安全和質(zhì)量。


在疫苗生產(chǎn)過程中,為了獲得高滴度高質(zhì)量的病毒培養(yǎng)液,需要高密度的培養(yǎng)細(xì)胞基質(zhì)。細(xì)胞高密度培養(yǎng)主要從培養(yǎng)基著手,通過補(bǔ)充某些營(yíng)養(yǎng)添加因子優(yōu)化培養(yǎng)基促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。最常用的添加因子是新生小牛血清,它能夠提供給 Vero細(xì)胞在體外貼附培養(yǎng)的必需物質(zhì)。


貼壁因子、生長(zhǎng)因子、激素、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),在體外模擬穩(wěn)定的環(huán)境,促進(jìn)細(xì)胞高密度生長(zhǎng)。但是血清是成分復(fù)雜的混合物,其所含的組分不完全明確,因此,細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中血清的使用存在諸多的缺點(diǎn)和風(fēng)險(xiǎn)。


締一生物為您介紹一款可用于Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基,由國(guó)際上HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE199-1和SFRE199-2。它們作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,是M199的改良款。其主要的區(qū)別是改變了M199培養(yǎng)基的部分營(yíng)養(yǎng)成分配方,調(diào)整了氨基酸和葡萄糖的濃度,并加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚精蛋白鋅胰島素。另外,還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。其中SFRE 199-1有Hank's鹽;SFRE 199-2含有Earle's鹽,不含胰島素,可在使用前自行添加。


據(jù)報(bào)道,用含5%新生牛血清的改良M199和傳統(tǒng)M199進(jìn)行了對(duì)比,發(fā)現(xiàn)兩種培養(yǎng)基培養(yǎng)72h時(shí),Vero細(xì)胞均已長(zhǎng)成致密單層,使用改良M199培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞密度平均值顯著高于進(jìn)口M199培養(yǎng)基。


締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)及檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。


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