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弧菌及其分離鑒別

2018-09-12 10:21來源：締一生物

弧菌不屬于人們常見的腸桿菌科，而是屬于弧菌科和弧菌屬。它是一群直或彎曲的革蘭氏陰性菌。它有一個鞭毛，能迅速游動。它對營養(yǎng)沒有太嚴(yán)格的要求，葡萄糖就可作為它的碳源。大多數(shù)需要2-4%氯化鈉或其他鹽，或微量元素以達到**生長。弧菌在淡水和海水中都能存在。而副溶血性弧菌主要存在于近海的海水、魚蝦、貝殼以及鹽漬加工的海產(chǎn)品中。霍亂弧菌則在較差的衛(wèi)生環(huán)境中容易爆發(fā)。


與人類感染有關(guān)的弧菌有12種，其中霍亂弧菌能導(dǎo)致人患上霍亂疾病。副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌則是海產(chǎn)品所致胃腸炎的首要原因。還有創(chuàng)傷弧菌、溶藻弧菌等也能導(dǎo)致胃腸炎和腸道外感染。


弧菌是兼性需氧菌，無芽孢。大多數(shù)為氧化酶陽性。很多方面，弧菌和腸桿菌科很像，而氧化酶陽性和有動力可將弧菌與腸桿菌科內(nèi)成員區(qū)分。弧菌與假單胞菌也有一定相似。發(fā)酵葡萄糖可將弧菌與假單胞菌和其他非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌進行區(qū)分。


弧菌最常用的分離培養(yǎng)基為TCBS瓊脂和堿性蛋白胨水。在TCBS中，蔗糖是重要的鑒別劑。溴麝香草酚藍(lán)和麝香草酚是混合性指示劑，能指示蔗糖發(fā)酵。副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌不發(fā)酵蔗糖顯藍(lán)-綠色，而霍亂弧菌和溶藻弧菌發(fā)酵蔗糖顯黃色。該培養(yǎng)基還含有硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵指示系統(tǒng)，能檢測硫化氫的產(chǎn)生。只要是弧菌，均應(yīng)硫化氫陰性。


TCBS的缺點是無法檢出能發(fā)酵蔗糖的一些伴隨菌，如變形桿菌，它也發(fā)酵蔗糖而產(chǎn)生黃色；假單胞菌和氣單孢菌在TCBS上也會呈現(xiàn)藍(lán)-綠色。一些霍亂菌株發(fā)酵蔗糖較慢，從而呈現(xiàn)綠色或無色。


HiCrome弧菌顯色培養(yǎng)基中，弧菌顯色并不受其他雜菌的影響，這是因為顯色反應(yīng)是基于β-半乳糖苷酶和培養(yǎng)基中的底物反應(yīng)。該培養(yǎng)基中的高鹽濃度和堿性pH值有助于提升選擇性。該顯色培養(yǎng)基主要依賴于特殊的顯色劑，而不依賴于糖發(fā)酵，因而得以將霍亂弧菌和副溶血性弧菌進行區(qū)分。霍亂弧菌為紫色菌落，副溶血性弧菌為藍(lán)綠色菌落。




關(guān)于弧菌的鑒定，現(xiàn)在已有弧菌的生化鑒定試劑盒，使用起來十分方便。例如HiMedia公司生產(chǎn)的弧菌鑒定試劑盒，里面集成了12種生化反應(yīng)，包括伏普試驗、精氨酸脫羧、檸檬酸發(fā)酵、ONPG、甘露醇發(fā)酵、阿拉伯糖發(fā)酵、蔗糖發(fā)酵、水楊苷發(fā)酵、纖維二糖發(fā)酵等，可以鑒定出28種弧菌。準(zhǔn)確度能達到99%以上。