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科學家利用基因編輯技術(shù)治療艾滋病

2018-05-24 13:50來源：生物谷

CRISPR/Cas9系統(tǒng)為編輯HIV-1病毒基因組提供了一種新的有潛力的工具，近日來自日本神戶大學醫(yī)學院感染疾病中心及健康科學研究生院國際衛(wèi)生系的研究人員設(shè)計了一種RNA引導的CRISPR/Cas9以靶向HIV-1調(diào)節(jié)基因tat和rev，其中的引導RNAs（gRNA）都基于CRISPR的特異性設(shè)計，其靶向的序列在6種主要的HIV-1亞型中都保守存在。


在共轉(zhuǎn)染前每個gRNA都被克隆進CRISPRv2慢病毒中，從而創(chuàng)造了慢病毒載體并將之轉(zhuǎn)導進入細胞。和沒有轉(zhuǎn)染以及轉(zhuǎn)染空載體的細胞相比，CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染穩(wěn)定表達Tat和Rev的293?T和HeLa細胞后，細胞中的這兩個基因表達都被成功的抑制。


Tat功能試驗顯示轉(zhuǎn)染tat-CRISPR顯著抑制了HIV-1啟動子驅(qū)動的熒光素酶的表達，而Rev功能試驗則顯示轉(zhuǎn)染rev-CRISPR后gp120的表達被完全抑制。Cas9剪切位點的靶基因出現(xiàn)高頻的各種程度的突變。值得注意的是，研究人員沒有檢測到任何非靶標靶位點出現(xiàn)突變，同時Cas9的表達對細胞的活性沒有影響。


研究人員進一步在HIV-1感染的T細胞系中測試了他們的CRISPR/Cas9系統(tǒng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)就算進行細胞因子再刺激，p24的表達也被顯著抑制，而同時使用6種gRNAs可以進一步增強編輯效率。因此利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)靶向HIV-1調(diào)節(jié)基因也許是一種實現(xiàn)功能性治愈的有效方法。