嬰兒配方食品中的葉酸測定細解（準備篇）

根據我國的食品安全標準，對嬰兒配方食品需測定葉酸含量，以保證在正常范圍。具體測定以微生物培養法為首選。小編現將具體過程拆解如下，以資感興趣人士參考。

所需儀器有天平、培養箱、離心機（需能放置試管）、超聲波振蕩器、pH計、分光光度計、渦旋振蕩器等。所需培養基有維持培養基、接種培養基和測定培養基，可購買商品化產品（建議進口產品，以保證質量），以節省人力和時間。培養基干粉需按產品說明制備和滅菌，放置在10℃以下密閉容器中保存。

樣本制備，可直接稱量0.1至0.5g，精確至小數點后三位，轉入100ml錐形瓶中。用80ml氫氧化鈉乙醇溶液溶解，超聲震蕩2-4小時，加水定容。對樣本液進行適當稀釋，使樣本葉酸含量在0.2ng/ml~0.6ng/ml中。

再取3支試管（所用試管需嚴格鹽酸浸泡和高溫烘干消毒），分別加入0.5、1.0、2.0ml稀釋后的樣本，補水至5ml。再加入5ml葉酸測定用培養液，混勻。

制備葉酸標準溶液。先制備儲存液（20μg/ml），即稱取20mg標準品，用氫氧化鈉溶液在1000ml容量瓶中溶解定容，再用分光光度法進行濃度標定。儲存液可在棕色瓶中4℃儲存2年。用儲存液可配置中間液（0.2μg/ml）和工作液（0.2ng/ml）。再配濃度梯度工作液，使葉酸量從0ng, 0.05ng, 0.1ng,0.2ng遞增至1ng（先補水5ml，再加5ml葉酸測定用培養液）。再高壓滅菌15分鐘。

測定時，向每支測定管加入20μl接種液，塞好棉塞，37℃培養20-40小時，直至獲得**渾濁度。

那么，接種菌液如何制備，最后如何用分光光度計檢測和分析結果呢？小編下次為您拆解。

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